Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Wyszukujesz frazę "Real-time PCR" wg kryterium: Temat


Tytuł:
Development of TaqMan-based real-time PCR assay based on the E1 genefor the quantitative detection of the Getah virus
Autorzy:
Lin, A.
Hu, X.
Cui, S.
Yang, T.
Zhang, Z.
Li, P.
Guo, M.
Lu, Y.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/16647453.pdf
Data publikacji:
2023
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czasopisma i Monografie PAN
Tematy:
Getah virus
real-time PCR
TaqMan
detection
Opis:
To develop a sensitive, specific, and rapid approach for the detection Getah virus (GETV), a set of primers targeting the conserved region of the E1 gene was created. The TaqMan-based real-time PCR method for GETV detection was developed by optimizing the reaction conditions. The method demonstrated excellent specificity, and amplification did not occur with the causative agents of all prevalent swine viral infections (CSFV, PRRSV, PRV, PEDV, PTV, and JEV), except GETV. Additionally, upon assessing the sensitivity of the method, the minimum detection limit for GETV was found to be 5.94 copies/μL, which is 10 times higher than that of the traditional PCR approach. Further, the intra- and inter-assay variation coefficients were less than 1%, demonstrating good repeatability. Moreover, GETV was found in 10 of the 20 field serum samples using real-time PCR but only in three of the samples using traditional PCR. Consequently, the first GETV TaqMan-based real-time PCR approach based on the E1 gene was developed for GETV pathogenic diagnoses, and this exhibited high specificity, sensitivity, and repeatability. This assay is practical for the pathogenic diagnosis and epidemiology of GETV.
Źródło:
Polish Journal of Veterinary Sciences; 2023, 26, 1; 21-28
1505-1773
Pojawia się w:
Polish Journal of Veterinary Sciences
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Metody identyfikacji gatunkowej grzybów z rodzaju Candida. Część II. Techniki molekularne
Methods for species identification of genus Candida fungi. Part II. Molecular techniques
Autorzy:
Gnat, Sebastian
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/22326536.pdf
Data publikacji:
2022
Wydawca:
Krajowa Izba Lekarsko-Weterynaryjna
Tematy:
choroby grzybicze
grzybice
Candida
identyfikacja gatunkowa
metody
metody molekularne
test PCR
metoda multiplex PCR
metoda nested-PCR
metoda real time PCR
fluorescencyjna hybrydyzacja in situ
spektrometria mas MALDI-TOF MS
czynniki chorobotwórcze
grzyby chorobotwórcze
łańcuchowa reakcja polimerazy
piroliza ze spektometrią mas
identification
molecular techniques
MALDI-TOF MS
Opis:
A rapid and accurate identification of the Candida is crucial for clinical treatment of local and systemic candidiasis. Premature diagnosis of invasive fungal infections is problematic because most clinical signs are non-specific and cultures are often negative or become positive too late for the initiation of effective antifungal therapy. Therefore, studies have been performed to improve molecular techniques for the diagnosis of candidiasis. Today, molecular strategies, such as PCR and non-PCR based methods are used to complement conventional laboratory approach. They provide accurate results in much short time of 1.5–3 h. Given the high accuracy and time saving with molecular typing techniques it is likely that most of these methods could improve routine clinical laboratory identification of Candida yeast species. However, further studies are needed for standardization of such procedures. This article presents an overview and discussion on molecular identification methods in the context of their application for the diagnosis of Candida fungi. Particular attention has been focused on the advantages and limitations of the indicated methods and the possibilities of their implementation for routine use in clinical laboratories.
Źródło:
Życie Weterynaryjne; 2022, 97, 03; 167-174
0137-6810
Pojawia się w:
Życie Weterynaryjne
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Presence of Coxiella burnetii in dairy cattle and farms in the Czech Republic
Autorzy:
Dobos, A.
Fodor, I.
Tekin, T.
Đuričić, D.
Samardzija, M.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/16539155.pdf
Data publikacji:
2022
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czasopisma i Monografie PAN
Tematy:
Q fever
surveillance
ELISA
real-time PCR
bulk tank milk
Opis:
The aims of this study were to evaluate the prevalence of Coxiella burnetii on both herd and animal level based on ELISA and PCR tests. Antibodies to C. burnetii were detected in 22 out of the 24 bulk tank milk samples (91.6%) tested by ELISA and the IS1111 element of C. burnetii was detected in 10 out of the 24 samples (41.6%) by real-time polymerase chain reaction (PCR). ELISA testing showed individual seropositivity in 67 out of the 165 cows (40.6%) examined in 24 dairy cattle farms in different parts of the Czech Republic. Our study revealed that the prevalence of C. burnetii has increased substantially in the Czech Republic over the past 30 years, and that the causative agent is a potential risk factor for some reproductive problems in dairy farms and a possible risk factor for human infection.
Źródło:
Polish Journal of Veterinary Sciences; 2022, 25, 2; 231-235
1505-1773
Pojawia się w:
Polish Journal of Veterinary Sciences
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Cryptosporidiosis outbreak on a dairy farm: Detection of Cryptosporidium parvum as a causative agent in the water source
Autorzy:
Karakavuk, M.
Can, H.
Döşkaya, M.
Karakavuk, T.
Erkunt-Alak, S.
Köseoğlu, A.E.
Gül, A.
Ün, C.
Gürüz, Y.
Değirmenci-Döşkaya, A.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2087099.pdf
Data publikacji:
2021
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
neonatal calves
Cryptosporidium parvum
diarrhea
Real-time PCR
calf lose
Źródło:
Polish Journal of Veterinary Sciences; 2021, 24, 3; 323-333
1505-1773
Pojawia się w:
Polish Journal of Veterinary Sciences
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Development of a SYBR Green I real-time PCR assay for detection of novel porcine parvovirus 7
Autorzy:
Li, Y.D.
Yu, Z.D.
Bai, C.X.
Zhang, D.
Sun, P.
Peng, M.L
Liu, H.
Wang, J.
Wang, Y.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2087207.pdf
Data publikacji:
2021
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
Capsid gene
PPV7
SYBR Green I real-time PCR
Źródło:
Polish Journal of Veterinary Sciences; 2021, 24, 1; 43-49
1505-1773
Pojawia się w:
Polish Journal of Veterinary Sciences
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Species of the genus Fusarium and Fusarium toxins in the grain of winter and spring wheat in Poland
Gatunki z rodzaju Fusarium oraz toksyny fuzaryjne w ziarnie pszenicy ozimej i jarej w Polsce
Autorzy:
Góral, Tomasz
Ochodzki, Piotr
Nielsen, Linda Kærgaard
Walentyn-Góral, Dorota
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2199229.pdf
Data publikacji:
2021-11-17
Wydawca:
Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Tematy:
deoksyniwalenol
DNA
fuzarioza kłosów
niwalenol
real-time PCR
trichoteceny
zearalenon
deoxynivalenol
Fusarium head blight
nivalenol
trichothecenes
zearalenone
Opis:
The aim of the study was to determine the presence of Fusarium species and mycotoxins in wheat grain from harvest in 2009 and 2010 in Poland. Samples from different locations were analyzed for the content of DNA of Fusarium species and mycotoxins. In 2009, DNA of F. graminearum and F. poae was present in all samples, F. culmorum in 82% of samples, and F. avenaceum in 55% of samples. In 2010, the highest content of DNA was found for F. graminearum followed by F. avenaceum, F. poae and F. langsethiae. The amount of F. culmorum DNA was very low. The most frequently occurring species were F. poae and F. graminearum, however, the amount of F. poae DNA was lower. In 2009, deoxynivalenol was detected in all samples. In 2010, the average content of deoxynivalenol was lower than in 2009. Nivalenol was detected at very low concentration in both years. Significant correlations between content of F. graminearum DNA and deoxynivalenol concentration in the grain and between content of F. poae DNA and nivalenol concentration in the grain in 2009 were found.
Celem badania było określenie obecności gatunków Fusarium i mykotoksyn występujących w ziarnie pszenicy w Polsce w latach 2009 i 2010. Próby ziarna pochodzące z różnych regionów Polski zostały przeanalizowane pod kątem zawartości DNA grzybów z rodzaju Fusarium oraz mykotoksyn. W 2009 roku DNA F. graminearum i F. poae było obecne we wszystkich próbach, F. culmorum w 82% prób, F. avenaceum w 55% próbek. W 2010 r. najwyższą zawartość DNA stwierdzono dla F. graminearum, a następnie F. avenaceum, F. poae i F. langsethiae. Ilość DNA F. culmorum była bardzo niska. Najczęściej występującymi gatunkami były F. poae i F. graminearum. Jednakże ilość DNA F. poae była niższa. W 2009 r. we wszystkich próbach wykryto deoksyniwalenol. W 2010 r. średnia zawartość deoksyniwalenolu była niższa niż w 2009 r. Niwalenol wykryto w bardzo niskim stężeniu w obu latach. Stwierdzono istotność korelacji między zawartością DNA F. graminearum a stężeniem deoksyniwalenolu w ziarnie oraz między zawartością DNA F. poae a stężeniem niwalenolu w ziarnie w 2009 r.
Źródło:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin; 2021, 296; 25-42
0373-7837
2657-8913
Pojawia się w:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
A 56-year-old man with RT-PCR negative nasopharyngeal swabs with Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) Pneumonia
Autorzy:
Dworzańska, A.
Tudrujek-Zdunek, M.
Mosiewicz, J.
Panasiuk, L.
Tomasiewicz, K.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2085530.pdf
Data publikacji:
2020
Wydawca:
Instytut Medycyny Wsi
Tematy:
RT-PCR
pneumonia
Covid-19
Coronavirus Disease 2019
chest computed tomography
real-time-reverse transcription-polymerase chain-reaction
Opis:
Introduction. Diagnostic procedure in Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) is based mainly on performing real-time-reverse transcription-polymerase chain-reaction (RT-PCR), which has been accepted as the gold standard method. In some cases, such as mutations of the SARS-CoV-2 genome, variable viral load kinetics or laboratory errors, it can be false-negative. Case report. The case is presented of a 56-year-old man with respiratory tract symptoms, with twice negative results of real-time-reverse transcription-polymerase chain-reaction of nasopharyngeal swabs and positive chest computed tomography, with typical findings for COVID-19 pneumonia. Conclusions. Patients with negative RT-PCR results, but with positive computed tomography findings characteristic for COVID-19, should be treated as well as those infected.
Źródło:
Annals of Agricultural and Environmental Medicine; 2020, 27, 2; 317-318
1232-1966
Pojawia się w:
Annals of Agricultural and Environmental Medicine
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Fusarium species and Fusarium mycotoxins in grain of barley in Poland in 2009 and 2010. Short communication
Gatunki Fusarium oraz toksyny fuzaryjne w ziarnie jęczmienia w Polsce w 2009 i 2010r. Komunikat
Autorzy:
Góral, Tomasz
Ochodzki, Piotr
Kærgaard Nielsen, Linda
Walentyn-Góral, Dorota
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2199480.pdf
Data publikacji:
2020-02-12
Wydawca:
Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Tematy:
DNA
Fusarium
jęczmień
real-time PCR
trichoteceny
barley
trichothecenes
Opis:
Grain samples of spring barley from the 2009 and 2010 harvest were analysed for the content of DNA of Fusarium species and Fusarium toxins (type B trichothecenes). Samples originated from different fields in Radzików, Central Poland. Qualitative and quantitative determination of Fusarium species in the grain was performed using a real-time PCR. Fusarium toxins in the grain were analysed by gas chromatography. Seven Fusarium species were detected in barley grain. The dominating species were F. avenaceum, F. graminearum and F. poae. The presence of F. culmorum, F. langsethiae, F. sporotrichioides and F. tricinctum was also detected. The concentration of trichothecene toxins in grain (deoxynivalenol, nivalenol) was low. The highest correlation coefficient of deoxynivalenol vs. Fusarium DNA was found for F. graminearum. Regarding nivalenol, the highest correlation coefficient was with F. poae DNA.  
Próby ziarna jęczmienia jarego ze zbiorów w 2009 i 2010r. zostały przeanalizowane pod kątem zawartości DNA gatunków Fusarium i toksyn fuzaryjnych (trichotecenów B). Próbki pochodziły z różnych pól z Radzikowa, w środkowej Polsce. Jakościowe i ilościowe oznaczanie gatunków Fusarium w ziarnie przeprowadzono techniką real-time PCR. Toksyny fuzaryjne w ziarnie analizowano metodą chromatografii gazowej. W ziarnie jęczmienia wykryto siedem gatunków Fusarium. Dominujące gatunki to F. avenaceum, F. graminearum i F. poae. Wykryto również występowanie F. culmorum, F. langsethiae, F. sporotrichioides i F. tricinctum. Stężenie trichotecenów B (deoksyniwalenolu, niwalenolu) w ziarnie było niskie. Najwyższy współczynnik korelacji deoksyniwalenol vs. DNA Fusarium stwierdzono dla F. graminearum. Jeśli chodzi o niwalenol, najwyższy był współczynnik korelacji z DNA F. poae.  
Źródło:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin; 2020, 288; 41-46
0373-7837
2657-8913
Pojawia się w:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Prevalence of the factor V Leiden mutation in patients susceptible to venous thromboembolism
Częstość występowania mutacji czynnika V Leiden u pacjentów ze skłonnością do żylnej choroby zakrzepowo-zatorowej
Autorzy:
Mitrus, J.M.
Wierszyło, E.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2048961.pdf
Data publikacji:
2020
Wydawca:
Akademia Bialska Nauk Stosowanych im. Jana Pawła II w Białej Podlaskiej
Tematy:
hypercoagulability
Leiden mutation
genotyping techniques
Real-Time PCR
nadkrzepliwość
mutacja Leiden
genotypowanie
Opis:
Background. A tendency to venous thromboembolism is otherwise called hypercoagulability or thrombophilia. This disease can be acquired or have a genetic background, and may lead to pulmonary embolism. The basis for analysis and selection of treatment is genetic diagnosis, which detects the G1691A mutation in the factor V gene (factor V Leiden) – the best known congenital thrombophilia marker. Material and methods. The study was carried out in the years 2015-2017 on samples taken from patients (462 men and 1284 women) with a tendency to venous thromboembolism. Real-Time PCR was used to detect G1691A mutation in factor V gene. The analyses were performed in the Hematology Laboratory of the Center of Laboratory Medicine at the Medical University of Gdańsk. Results. Significant differences in the frequency of Leiden mutation were shown. This mutation predominated in men (25%), while in women G1691A mutation was detected with a 15% frequency (p=0.04). All possible genotypes were found among the subjects and the percentage of heterozygotes and homozygotes in both genders was similar. Conclusions. Congenital t hrombophilia a ssociated w ith G1691A mutation of f actor V Leiden gene was found to be more common in men than in women. All possible genotypes were determined in the pool of test subjects. The mutation was most frequently detected in patients between 30 and 40 years of age, and rarely after 70 years of age.
Wprowadzenie. Nadkrzepliwość (trombofilia) jest to skłonność do żylnej choroby zakrzepowozatorowej. Choroba ta może być nabyta lub mieć podłoże genetyczne i może prowadzić do zatorowości płucnej. Podstawą analizy i doboru leczenia jest diagnostyka genetyczna. Celem tej diagnostyki jest wykrycie mutacji G1691A w genie czynnika V (czynnik V Leiden) – najlepiej poznanego markera trombofilii wrodzonej. Materiał i metody. Badania zostały przeprowadzone w latach 2015-2017 na próbkach pobranych od pacjentów (462 mężczyzn i 1284 kobiet) ze skłonnością do żylnej choroby zakrzepowozatorowej. W celu wykrycia mutacji G1691A w genie czynnika V zastosowano metodę Real-Time PCR. Analizy zostały wykonane w Laboratorium Hematologii Uniwersyteckiego Centrum Medycyny Laboratoryjnej przy Gdańskim Uniwersytecie Medycznym. Wyniki. Wykazano istotne statystycznie różnice w częstości występowania mutacji Leiden. Mutację częściej występowała w grupie mężczyzn (25%), zaś u kobiet mutację G1691A wykrywano z częstością 15% (p=0,04). Wśród osób badanych stwierdzono wszystkie możliwe genotypy, a procentowy udział heterozygot i homozygot u obu płci był zbliżony. Wnioski. Trombofilia wrodzona związana z mutacją G1691A w genie czynnika V Leiden częściej występowała u mężczyzn niż kobiet. W puli osób poddanych testom oznaczono wszystkie możliwe genotypy. Mutację najczęściej wykrywano u pacjentów w przedziale wiekowym 30-40 lat, a najrzadziej po 70 roku życia.
Źródło:
Health Problems of Civilization; 2020, 14, 2; 83-93
2353-6942
2354-0265
Pojawia się w:
Health Problems of Civilization
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Metoda PCR w ocenie zafałszowań składu surowcowego produktów mięsnych ze strusia (Struthio camelus)
The pCR method in the assessment authenticity of meat products from ostrich (Struthio camelus)
Autorzy:
Sawicki, W.
Zych, A.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2130220.pdf
Data publikacji:
2019
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Technologów Żywności
Tematy:
mięso strusia
identyfikacja
zafałszowania żywności
real-time PCR
Opis:
Poprawne znakowanie mięsa pozwalające konsumentowi świadomie wybrać jego rodzaj jest istotne z wielu względów – od zdrowotnych po religijne. Ponadto ze względu na różnice cen i dostępność surow- ców mięsnych pochodzących z różnych gatunków zwierząt zdarzają się przypadki fałszowania żywności. Składniki wyrobów mięsnych są wykorzystywane nieadekwatnie do informacji podanej na etykiecie. Niezgodności dotyczą zarówno użytych surowców, jak i ich zawartości w produkcie mięsnym. Mięso o wysokiej jakości zastępuje się tańszym lub jego zawartość jest mniejsza od deklarowanej. Choć obowią- zują przepisy dotyczące znakowania przetworzonych produktów mięsnych, zdarzają się przypadki wystę- powania na rynku wyrobów mięsnych zafałszowanych. W niniejszych badaniach podjęto się opracowania procedury weryfikacji autentyczności wyrobów z mięsa strusia czerwonoskórego (Struthio camelus). Zaproponowano metodę wykorzystującą technikę real-time PCR. Jak wykazano, DNA jest wystarczająco stabilne, aby wytrzymać zróżnicowaną obróbkę technologiczną. Badania prowadzono z użyciem wyrobów modelowych oraz wyrobów mięsnych (kiełbas, steków, mięsa gulaszowego) zakupionych w handlu deta- licznym. Próbki były analizowane pod względem obecności niedeklarowanych gatunków mięsa (wie- przowiny, wołowiny, mięsa z kurcząt, kaczek i gęsi) z wykorzystaniem gatunkowo specyficznych starte- rów. Na podstawie otrzymanych wyników wykazano, że opracowana procedura identyfikacji mięsa strusia może być z powodzeniem stosowana w rutynowych kontrolach, zarówno jakościowych (wykluczenie danego gatunku), jak i ilościowych (oznaczenie udziału mięsa strusia) w tego typu żywności. Wykazano ponadto, że w wyrobach przetworzonych może występować problem niedeklarowanego dodatku mięsa innego niż wskazane na etykiecie.
Źródło:
Żywność Nauka Technologia Jakość; 2019, 26, 2; 32 - 42
1425-6959
Pojawia się w:
Żywność Nauka Technologia Jakość
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Poszukiwanie źródeł odporności owsa (Avena sativa L.) na nowy patogeniczny i mykotoksynotwórczy gatunek — Fusarium langsethiae
Searching for oat (Avena sativa L.) resistance to a new pathogenic and mycotoxigenic species — Fusarium langsethiae
Autorzy:
Lemańczyk, Grzegorz
Łukanowski, Aleksander
Baturo-Cieśniewska, Anna
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2199496.pdf
Data publikacji:
2019-11-30
Wydawca:
Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Tematy:
Fusarium langsethiae
hodowla odpornościowa
owies
postęp hodowlany
real-time PCR
wrażliwość genotypów
Źródło:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin; 2019, 286; 165-168
0373-7837
2657-8913
Pojawia się w:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
TaqMan real-time PCR for detecting bovine viral diarrhea virus
Autorzy:
Liang, H.
Geng, J.
Bai, S.
Aimuguri, A.
Gong, Z.
Feng, R.
Shen, X.
Wei, S.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2087557.pdf
Data publikacji:
2019
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
bovine viral diarrhea virus
quantitative real time PCR
TaqMan probe
Źródło:
Polish Journal of Veterinary Sciences; 2019, 2; 405-413
1505-1773
Pojawia się w:
Polish Journal of Veterinary Sciences
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
The expression of androgen receptor in neurons of the anterior pelvic ganglion and celiac-superior mesenteric ganglion in the male pig
Autorzy:
Kaleczyc, J.
Kasica-Jarosz, N.
Pidsudko, Z.
Przyborowska, A.
Sienkiewicz, W.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2087598.pdf
Data publikacji:
2019
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
androgen receptor
neurons
anterior pelvic ganglion
celiac-superior mesenteric ganglion
quantitative real-time PCR
immunohistochemistry
male pig
Źródło:
Polish Journal of Veterinary Sciences; 2019, 1; 151-155
1505-1773
Pojawia się w:
Polish Journal of Veterinary Sciences
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
The multiple HPV infections and their possible significance in predicting the risk of the cervical cancer
Autorzy:
Kożańska, Aleksandra
Pisarska, Justyna
Baldy-Chudzik, Katarzyna
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1070878.pdf
Data publikacji:
2019
Wydawca:
Przedsiębiorstwo Wydawnictw Naukowych Darwin / Scientific Publishing House DARWIN
Tematy:
HPV co-infection
PCR-RFLP
Real-Time PCR
cervical cancer
human papillomavirus
Opis:
Infections with human papillomavirus (HPV) are detected frequently. The occurrence of persistent infection with oncogenic HPV type associates with the development of cervical cancer. However, the part of HPV infections consist of the multiple viral types. The influence of HPV co-infections on the risk of the development of cervical cancer is not clear, but the occurrence of more than one viral type seems to increase the risk of advanced lesions of the uterine cervix. Additionally, possible interactions (both positive and negative) between particular HPV types in co-infections may influence the risk of the lesions progression. Although, the issue of HPV co-infections is not well known, the previous scientific reports make that the introduction of the molecular methods, allowing the identification not only single but also multiple HPV infections, in routine diagnostics seem to be important. Here, we present the PCR-RFLP and Real-Time PCR methods as the useful tools in the diagnostics of HPV infections.
Źródło:
World Scientific News; 2019, 123; 192-207
2392-2192
Pojawia się w:
World Scientific News
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Optimization of flotation, DNA extraction and PCR methods for detection of Toxoplasma gondii oocysts in cat faeces
Autorzy:
Sroka, J.
Karamon, J.
Dutkiewicz, J.
Wójcik-Fatla, A.
Cencek, T.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2081971.pdf
Data publikacji:
2018
Wydawca:
Instytut Medycyny Wsi
Tematy:
flotation
Toxoplasma gondii
faeces
Real time PCR
nested PCR
cats
oocysts detection
Opis:
Introduction and objective. The aim of the study was to compare the effectiveness of selected oocysts concentration methods, DNA extraction protocols and PCR assays targeting the B1 gene, for the development of procedures which would be effective and useful in laboratory practice for the detection of T. gondii in faecal samples from cats. Materials and method. In order to compare the influence of the flotation fluids on microscopy and PCR detection of T. gondii, saturated solutions of saccharose, MgSO4, ZnSO4 and NaNO3 were used. To determine the sensitivity of PCR tests used: Real time PCR (RT) and nested PCR, water samples spiked with T. gondii tachyzoites and oocysts were tested. DNA was extracted using DNeasy Blood and Tissue Kit (Qiagen) (K1). The same PCR tests were used to assess the efficacy of T. gondii DNA detection in samples of cat faeces spiked with oocysts, using DNA extraction by a K1 set and a K2 set (QIamp DNA Stool Mini Kit, (Qiagen). Results. The initial results showed that NaNO3 was most useful as a flotation fluid due to the lack negative effect on the oocysts and amplification efficacy in PCR. The level of detection for water samples (100 μl) was determined as 100 tachyzoites and 1–50 oocysts in RT, and 2–20 oocysts in nested PCR. The limit of detection (LD) for stool samples (250 mg) spiked with oocysts, where the K1 set was used, determined as 250 and 5 oocysts in RT and nested PCR, respectively. For samples extracted with the K2 set, LD in RT was determined as 1–50 oocysts (depending on the variant) and 50 oocysts in nested PCR. Conclusions. The most effective methods for detection of T. gondii in cat faeces seem to be centrifugal flotation with NaNO3, followed by DNA extraction with removing of inhibitors (K2 set) and Real Time PCR targeting B1 gene.
Źródło:
Annals of Agricultural and Environmental Medicine; 2018, 25, 4; 680-685
1232-1966
Pojawia się w:
Annals of Agricultural and Environmental Medicine
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł

Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies