Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Wyszukujesz frazę "łańcuchowa reakcja polimerazy" wg kryterium: Temat


Tytuł:
Metody identyfikacji genetycznie zmodyfikowanych organizmow w zywnosci
Methods of identification of genetically modified organisms in foods
Autorzy:
Dulinski, R
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/828604.pdf
Data publikacji:
2007
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Technologów Żywności
Tematy:
organizmy zmodyfikowane genetycznie
reakcja polimerazy lancuchowej zob.lancuchowa reakcja polimerazy
lancuchowa reakcja polimerazy
zywnosc
testy immunoenzymatyczne
identyfikacja
Opis:
W pracy przedstawiono najważniejsze metody analityczne stosowane w detekcji genetycznie zmodyfikowanej żywności. Zdecydowana większość technik polega na identyfikacji zmian w strukturze dwóch biologicznie czynnych makrocząsteczek: DNA oraz białek. W przypadku kwasów nukleinowych podstawowe narzędzie diagnostyczne stanowi reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR), pozwalająca na selektywną amplifikację wybranych regionów DNA wraz z jakościową i ilościową oceną wprowadzonych modyfikacji. Reakcja PCR w czasie rzeczywistym jest obecnie uznawana za wiodącą metodę analizy zawartości genetycznie zmodyfikowanych organizmów w roślinach uprawnych i produktach żywnościowych. Na określenie modyfikacji genetycznych manifestujących się na poziomie struktury białek pozwalają testy immunoenzymatyczne polegające na selektywnym rozpoznaniu rekombinantowego białka przez specjalnie zaprojektowane przeciwciało. Jednak zarówno uproszczony wariant identyfikacji kompleksu antygen – przeciwciało na nitrocelulozowym pasku, jak i klasyczna wersja testu immunochemicznego na mikropłytce traktowane są przede wszystkim jako metody oceny jakościowej. Wraz z rozwojem technologii manipulacji genowych, rosnącą liczbą transformacji roślin i prawdopodobnie w niedalekiej przyszłości zwierząt, obserwowana jest tendencja do opracowania wiarygodnych testów, pozwalających na detekcję oraz analizę ilościową kilku genetycznych modyfikacji w trakcie pojedynczego oznaczenia.
In this paper, the most important analytical methods applied in detection of genetically modified food are presented. Most of the techniques are based on identification of changes in structure of two biological active macromolecules: DNA and proteins. In case of nucleic acid, basic diagnostic tool is polymerase chain reaction (PCR), used in selective amplification of specific DNA fragments with qualitative and quantitative analysis of introduced modifications. Real-time PCR is actually established as a primary method in analysis of the contents genetically modified organisms in transgenic crops and foods. To estimate the genetic modification manifested on protein structure level there are introduced immunoenzymatic assays based on selective recognition of recombinant protein by specially designed antibody. Although simplified form with recognition of antigen-antibody complex on nitrocellulose strip and classic version of immunoenzymatic assay on microplate are mainly treated as qualitative methods. Together with the development of genetic manipulation, numbers of plant transformations are growing and probably, in the near future also animal transformations, there is a need to establish reliable tests for detection and quantification of several genetic modifications in a single analysis.
Źródło:
Żywność Nauka Technologia Jakość; 2007, 14, 4; 5-16
1425-6959
Pojawia się w:
Żywność Nauka Technologia Jakość
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Przydatnosc metody PCR i jej modyfikacji do diagnozowania inwazji pasozytniczych u przezuwaczy
Autorzy:
Wedrychowicz, H
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/836684.pdf
Data publikacji:
2000
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
przezuwacze
parazytologia
lancuchowa reakcja polimerazy
diagnostyka
inwazja pasozytnicza
przydatnosc
Opis:
Sensitivity and specificity are the two most important criteria that define the quality of a diagnostic technique. DNA probes and PCR-based techniques may simplify the diagnosis of parasitic infections. PCR is a powerful diagnostics tool. The method enables detection of even a very small amount of DNA. An extreme sensitivity of the PCR, being a major advantage of the method is also a cause of potentially false positive results. To achieve reliable diagnostic results several modifications have been introduced to the classic PCR procedure. PCR and PCR-based techniques are currently increasingly used for detection of parasitic infections, to differentiate closely related species which are difficult to be recognised with traditional methods, for estimation of parasite burdens, and for the detection of drug resistant strains.
Źródło:
Annals of Parasitology; 2000, 46, 3; 295-304
0043-5163
Pojawia się w:
Annals of Parasitology
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Przydatność metody PCR i jej modyfikacji do diagnozowania inwazji pasożytniczych u przeżuwaczy
Autorzy:
Wędrychowicz, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2148553.pdf
Data publikacji:
2000
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
przezuwacze
parazytologia
lancuchowa reakcja polimerazy
diagnostyka
inwazja pasozytnicza
przydatnosc
Opis:
Sensitivity and specificity are the two most important criteria that define the quality of a diagnostic technique. DNA probes and PCR-based techniques may simplify the diagnosis of parasitic infections. PCR is a powerful diagnostics tool. The method enables detection of even a very small amount of DNA. An extreme sensitivity of the PCR, being a major advantage of the method is also a cause of potentially false positive results. To achieve reliable diagnostic results several modifications have been introduced to the classic PCR procedure. PCR and PCR-based techniques are currently increasingly used for detection of parasitic infections, to differentiate closely related species which are difficult to be recognised with traditional methods, for estimation of parasite burdens, and for the detection of drug resistant strains.
Źródło:
Wiadomości Parazytologiczne; 2000, 46, 3; 295-304
0043-5163
Pojawia się w:
Wiadomości Parazytologiczne
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
The use of reverse transcription and polymerase chain reaction [RT-PCR] for the detection of hop latent viroid [HLVd]
Wykrywanie wiroida latentnego chmielu [HLVd] przy pomocy odwrotnej transkrypcji reakcji lancuchowej polimerazy [RT-PCR]
Autorzy:
Cajza, M
Wypijewski, K.
Pospieszny, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65322.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
patogeny roslin
lancuchowa reakcja polimerazy
wiroid latentny chmielu
wiroidy
odwrotna transkrypcja
wykrywanie
Opis:
The simple method of nucleic acids extraction, based on guanidine thiocyanate extraction buffer, was sufficient for obtaining a good templates for RT-PCR. The RT-PCR reactions were performer from the start to the end (both the reverse transcription and the HLVd-cDNA amplification) in the same reaction mixture and in the very small volume of reaction (10 μI). Both pairs of primers designed by authors were good for reverse transcription and later for amplification of the HLVd-cDNA. The presence of gelatin as a stabilizer of DNA polymerase was indispensable for successful performance of RT-PCR.
Wiroidy, najmniejsze obecnie znane patogeny roślin, zbudowane z pojedynczej nici kolistego RNA, nie zawierające w swej budowie i nie kodujące żadnych białek, są groźnymi patogenami roślin wyższych, rozpowszechnionymi we wszystkich rejonach świata, szczególnie w uprawach roślin rozmnażanych wegetatywnie. Wiroid latentny chmielu (ang. hop latent viroid - HLVd) został wykryty dopiero w 1988 roku w chmielu. Do tej pory odnotowano go w rejonach uprawy chmielu na całym świecie. Chmiel, jedyny znany żywiciel tego patogena, ulega tylko infekcjom utajonym (latentnym). HLVd powoduje zarówno spadek masy plonu szyszek jak i zawartości alfa-kwasów w szyszkach. Bezobjawowe infekcje oraz brak białek strukturalnych i innych produktów translacji powodują, że obecnie patogena tego można wykrywać tylko przy pomocy elektroforezy (metoda bardzo zawodna, wymagająca wysokiego stężenia RNA patogena w tkance), sond hybrydyzacyjnych i rozwijanej w ostatnich latach metody RT-PCR. Podczas opracowywania RT-PCR do wykrywania HLVd w ekstraktach kwasów nukleinowych wykorzystywano dwie pary primerów specyficznych dla sekwencji nukleotydowej HLVd, charakteryzujących się różnymi temperaturami topnienia produktu. Wiroida wykrywano w ekstraktach kwasów nukleinowych z blaszek liściowych i z ogonków liściowych chmielu. Uproszczona metoda guanidynowa do izolacji totalnych kwasów nukleinowych okazała się wystarczająca do przeprowadzenia reakcji RT-PCR. Opracowana metoda charakteryzowała się bardzo dużą czułością, specyficznością (produkty amplifikacji cDNA-HLVd uzyskiwano tylko z próbek materiału roślinnego pochodzącego z roślin zawierających tego wiroida) i szybkością wykonania (dwa dni łącznie z ekstrakcją kwasów nukleinowych). Ponadto w zastosowanej metodzie opracowano warunki do przeprowadzenia zarówno odwrotnej transkrypcji i następnie amplifikacji powstałego cDNA wiroida w jednej probówce, w tej samej mieszaninie reakcyjnej . Oprócz tego wszystkie reakcje RT-PCR prowadzono w bardzo małej objętości równej 10 μl (2 μl zawiesiny kwasów nukleinowych i 8 μl mieszaniny reakcji RT-PCR). Maksymalne uproszczenie metody, wielokrotne obniżenie kosztów reakcji oraz charakterystyczna dla RT-PCR czułość, specyficzność i szybkość przeprowadzenia testu sprawiają, że może być ona wykorzystywana do rutynowego wykrywania nie tylko HLVd ale również innych wiroidów, wirusoidów i wirusów RNA.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2; 52-58
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Metody molekularne wykorzystywane w identyfikacji pasozytow
Autorzy:
Kamola, D.
Prostek, A.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/836397.pdf
Data publikacji:
2010
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
pasozyty
identyfikacja
metody molekularne
lancuchowa reakcja polimerazy
metoda Real Time PCR
Źródło:
Annals of Parasitology; 2010, 56, 3; 221
0043-5163
Pojawia się w:
Annals of Parasitology
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Wykrywanie DNA Toxoplasma gondii w plynach ustrojowych metoda PCR
Autorzy:
Golab, E
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/837546.pdf
Data publikacji:
1995
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
metody badan
plyny ustrojowe
parazytologia
lancuchowa reakcja polimerazy
pasozyty
wykrywanie
DNA
Toxoplasma gondii
Opis:
The polymerase chain reaction (PCR) is used for in vitro amplification of specific DNA fragments. The PCR technique is based on the reiteration of a three-step process: denaturation DNA into single strands, annealing primers (specific synthetic oligonucleotides) to the DNA template and enzymatic extension from the primers along the templates. The usefulness of this new technique to the detection of Toxoplasma gondii DNA has been described.
Źródło:
Annals of Parasitology; 1995, 41, 1; 13-18
0043-5163
Pojawia się w:
Annals of Parasitology
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Usefulness of new DNA extraction procedure for PCR technique in species identification of Entamoeba isolates
Przydatnosc nowej metody izolacji DNA do identyfikacji izolatow Entamoeba technika PCR
Autorzy:
Myjak, P
Kur, J.
Pietkiewicz, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/836380.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
metody badan
parazytologia
lancuchowa reakcja polimerazy
izolaty
ameby
pasozyty
izolacja
Entamaeba
identyfikacja
DNA
Opis:
In this study we have developed a modified CLARK and DIAMOND (1992, 1993) method using the polymerase chain reaction to amplify amoebic ribosomal RNA genes that allow either specific detection of Entamoeba histolytica s. str. or amoeba species identification. DNA was isolated from cultured protozoa or from stool samples (cysts andlor trophozoites). Cultures of xenie or axenic material (also stool samples) were treated with Easy Genomic DNA Prep or Genomic DNA Prep Plus (A&A Biotechnology, Poland) for DNA isolation. With these new procedures, DNA can be obtained effectively and with high degree of purity. 13 amoeba strains were investigated. Three strains produced an 876 bp fragment with Psp5 and Psp3 primers (specific product for E. histolytica s. str). Three strains gave a specific 876 bp product for E. dispar with NPsp5 and NPsp3 primers. Two strains were E. moshkovskii as identified by KpnI digestion of PCR products obtained with RD5 and RD3 primers. Four strains (one of them was cultured in two laboratories) were E. invadens as identified by HinfI or HhaI digestion of PCR products obtained with RD5 and RD3 primers. Characteristic RFLP patterns with these enzymes was also obtained for E. terrapinae and Blastocystis hominis. This RFLP analysis show significant promise as a medical diagnostic tool particularly useful for species identification.
W przedstawionej pracy rozwinięto i zmodyfikowano metodę CLARKA i DIAMONDA (1992, 1993) amplifikacji techniką PCR pełzakowych genów kodujących rybosomalne RNA, pozwalających na swoiste wykrywanie Entamoeba histolytica sensu stricto lub identyfikację gatunkową pełzaków. DNA izolowano z pierwotniaków hodowanych in vitro lub z prób kału (cysty i/lub trofozoity). Izolację DNA z aksenicznych lub poliksenicznych kultur (także próbek kału) przeprowadzano przy użyciu Easy Genohistolytica DNA Prep lub Genomic DNA Prep Plus (A&A Biotechnology, Polska). Stosując te nowe procedury uzyskiwano DNA wydajnie i o dużym stopniu czystości. Przebadano 13 szczepów pełzaków. Trzy szczepy dawały produkty PCR o wielkości 876 pz ze starterami Psp5 i Psp3 (swoisty produkt dla E. histolytica s. str). Trzy szczepy dawały swoisty dla E. dispar produkt o wielkości 876 pz ze starterami NPsp5 i NPsp3. Dwa szczepy należały do E. moshkovskii, co wykazała indentyfikacja przez trawienie KpnI produktów PCR otrzymanych ze starterami RD5 i RD3. Cztery szczepy Geden z nich hodowany w dwóch laboratoriach) zidentyfikowano jako E. invadens przez trawienie HinfI i HhaI produktów PCR otrzymanych ze starterami RD5 i RD3. Charakterystyczny wzór RFLP z tymi enzymami otrzymano także z E. terrapinae i Blastocystis hominis. Ta analiza RFLP wskazuje na jej przydatność w diagnostyce medycznej, a szczególnie w identyfikacji gatunków.
Źródło:
Annals of Parasitology; 1997, 43, 2; 163-170
0043-5163
Pojawia się w:
Annals of Parasitology
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Usefulness of new DNA extraction procedure for PCR technique in species identification of Entamoeba isolates
Przydatność nowej metody izolacji DNA do identyfikacji izolatów Entamoeba technika PCR
Autorzy:
Myjak, P.
Kur, J.
Pietkiewicz, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2148930.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
metody badan
parazytologia
lancuchowa reakcja polimerazy
izolaty
ameby
pasozyty
izolacja
Entamaeba
identyfikacja
DNA
Opis:
In this study we have developed a modified CLARK and DIAMOND (1992, 1993) method using the polymerase chain reaction to amplify amoebic ribosomal RNA genes that allow either specific detection of Entamoeba histolytica s. str. or amoeba species identification. DNA was isolated from cultured protozoa or from stool samples (cysts andlor trophozoites). Cultures of xenie or axenic material (also stool samples) were treated with Easy Genomic DNA Prep or Genomic DNA Prep Plus (A&A Biotechnology, Poland) for DNA isolation. With these new procedures, DNA can be obtained effectively and with high degree of purity. 13 amoeba strains were investigated. Three strains produced an 876 bp fragment with Psp5 and Psp3 primers (specific product for E. histolytica s. str). Three strains gave a specific 876 bp product for E. dispar with NPsp5 and NPsp3 primers. Two strains were E. moshkovskii as identified by KpnI digestion of PCR products obtained with RD5 and RD3 primers. Four strains (one of them was cultured in two laboratories) were E. invadens as identified by HinfI or HhaI digestion of PCR products obtained with RD5 and RD3 primers. Characteristic RFLP patterns with these enzymes was also obtained for E. terrapinae and Blastocystis hominis. This RFLP analysis show significant promise as a medical diagnostic tool particularly useful for species identification.
Źródło:
Wiadomości Parazytologiczne; 1997, 43, 2; 163-170
0043-5163
Pojawia się w:
Wiadomości Parazytologiczne
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Wykrywanie DNA Toxoplasma gondii w płynach ustrojowych metodą PCR
DETECTION OF TOXOPLASMA GONDII DNA IN BODY FLUIDS BY POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)
Autorzy:
Gołąb, E.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2151376.pdf
Data publikacji:
1995
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
metody badan
plyny ustrojowe
parazytologia
lancuchowa reakcja polimerazy
pasozyty
wykrywanie
DNA
Toxoplasma gondii
Opis:
The polymerase chain reaction (PCR) is used for in vitro amplification of specific DNA fragments. The PCR technique is based on the reiteration of a three-step process: denaturation DNA into single strands, annealing primers (specific synthetic oligonucleotides) to the DNA template and enzymatic extension from the primers along the templates. The usefulness of this new technique to the detection of Toxoplasma gondii DNA has been described.
Źródło:
Wiadomości Parazytologiczne; 1995, 41, 1; 13-18
0043-5163
Pojawia się w:
Wiadomości Parazytologiczne
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Ocena wystepowania kretkow Borrelia burgdorferi sensu lato w kleszczach Ixodes ricinus na terenie wybranych rejonow Lubelszczyzny przy zastosowaniu metody lancuchowej reakcji polimerazy [PCR]
Autorzy:
Chmielewska-Badora, J
Cisak, E.
Zwolinski, J.
Dutkiewicz, J.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/838855.pdf
Data publikacji:
2003
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Parazytologiczne
Tematy:
wystepowanie
kleszcze
parazytologia
Ixodes ricinus
lancuchowa reakcja polimerazy
Borrelia burgdorferi
kretki
Lubelszczyzna
metody oceny
Opis:
Evaluation of occurrence of spirochetes Borrelia burgdorferi sensu lato in Ixodes ricinus ticks in selected areas of the Lublin Region by polimerase chain reaction method (PCR). During the period 2001-2002, 1098 Ixodes ricinus ticks were collected at forest sampling sites and the degree of their infection with Borrelia burgdorferi spirochetes was determined by means of polimerase chain reaction (PCR). The presence of Borrelia burgdorferi genetic material was noted in 69 cases (6.3%). lt was confirmed that the frequency of infection of adult forms of ticks (males and females) was nearly twice as high as nymphs. The highest degree of infection was observed in females – 9.5%. The degree of infection among males and nymphs was smaller - 5.9% and 4.4% respectively in individual provinces. The percentage of infected females ranged from 7.9% in the Zamość Province to 13.6% in the Włodawa Province. In males, the percentage of infected ticks remained within the range from 3.1% in the Lublin Province to 13.3% in the Lubartów Province.
Źródło:
Annals of Parasitology; 2003, 49, 2; 165-171
0043-5163
Pojawia się w:
Annals of Parasitology
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł

Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies