Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Wyszukujesz frazę "sondy TaqMan" wg kryterium: Temat


Wyświetlanie 1-2 z 2
Tytuł:
Zastosowanie technik genotypowania TaqMan® oraz tetra-primer ARMS-PCR do identyfikacji polimorfizmów punktowych zasocjowanych z genetycznymi determinantami kształtu korzenia marchwi
The use of TaqMan® and tetra-primer ARMS-PCR genotyping techniques for identification of single nucleotide polymorphisms associated with genetic determinants of root shape of carrot
Autorzy:
Stelmach, Katarzyna
Macko-Podgórni, Alicja
Barański, Rafał
Grzebelus, Dariusz
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/2199330.pdf
Data publikacji:
2018-08-29
Wydawca:
Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Tematy:
ARMS-PCR
GWAS
marchew
MLM
polimorfizm pojedynczego nukleotydu
sondy TaqMan®
carrot
MLN
Opis:
W ostatnich dwóch dekadach zaobserwowano znaczący wzrost tempa rozwoju zróżnicowanych systemów markerów molekularnych oraz odpowiadających im zaawansowanych platform detekcyjnych. Markery oparte na polimorfizmach pojedynczego nukleotydu (SNP), ze względu na częstość ich występowania w genomach bardzo szybko zyskały uznanie w badaniach z zakresu hodowli molekularnej roślin. Wśród najczęściej wykorzystywanych technik genotypowania polimorfizmów pojedynczego nukleotydu znajdują się sondy TaqMan®, mikromacierze DNA, oraz technologia genotypowania przez sekwencjonowanie (GBS). W celu obniżenia kosztów genotypowania opracowano również techniki oparte na standardowej reakcji łańcuchowej polimerazy z zastosowaniem zmodyfikowanych starterów, między innymi technikę tetra-primer ARMS-PCR. W niniejszej pracy zidentyfikowano pięć markerów SNP zasocjowanych z genetycznymi determinantami kształtu korzenia spichrzowego marchwi oraz dokonano ich przekształcenia do markerów wykrywalnych przy zastosowaniu technologii TaqMan® oraz tetra-primer ARMS-PCR. Przydatność wymienionych technik zweryfikowano poprzez genotypowanie 40 wybranych odmian populacyjnych marchwi typu zachodniego. Przeanalizowano zbieżność wyników identyfikacji genotypów otrzymanych przy zastosowaniu wyżej wymienionych technik oraz metody referencyjnej GBS. Techniki te oceniono pod kątem możliwości wykorzystania ich do opracowania wiarygodnych markerów specyficznych zasocjowanych z genetycznymi determinantami kształtu korzenia marchwi.
Over the last two decades a significant increase has been observed in the pace of development of diverse systems of molecular markers and the corresponding advanced detection platforms. Owing to their ubiquity in genomes, markers based on single nucleotide polymorphism (SNP) promptly gained recognition within research on molecular breeding of plants. Amongst the most widely used genotyping techniques of a single nucleotide polymorphisms are the TaqMan® probes, DNA micro-arrays and the genotyping-by-sequencing (GBS) technology. Techniques based on standard polymerase chain reaction with the use of modified primers, including the tetra-primer ARMS-PCR technique, have also been devised with in order to decrease the costs of genotyping. The current work identifies five SNP markers associated with genetic determinants of the shape of carrot taproot and converts them into markers detectable by the TaqMan® and tetra-primer ARMS-PCR technologies. The usefulness of the above techniques has been verified by genotyping 40 selected cultivars of Western-type carrot. The present authors have also analysed the convergence of the results obtained through the mentioned techniques and a GBS reference method. The techniques have been evaluated in terms of their usefulness for designing reliable specific markers associated with genetic determinants of the shape of the carrot root.
Źródło:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin; 2017, 282; 99-121
0373-7837
2657-8913
Pojawia się w:
Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Molekularna diagnostyka wybranych patogenów z rodzaju Phytophthora w ramach integrowanej ochrony roślin
Molecular diagnostic of Phytophthora pathogens as a tool for Integrated Pest Management
Autorzy:
Nowakowska, J.A.
Malewski, T.
Tereba, A.
Borys, M.
Oszako, T.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/989551.pdf
Data publikacji:
2016
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Leśne
Tematy:
fitopatologia
Phytophthora
wykrywanie
identyfikacja
Phytophthora alni subsp.multiformis
Phytophthora lacustris
Phytophthora taxon hungarica
metody badan
metoda real time PCR
sondy TaqMan
real time pcr
taqman
butt and fine root pathogens
phytophthora
Opis:
Traditional detection methods such as baiting or direct isolation take a long time and are incapable to handling large volume of material to be tested. The real−time PCR−based techniques are faster, more sensitive, more easily automated, and do not require post−amplification procedures. Species−specific primers for Phytophthora were designed based on the internal transcribed spacer regions (ITS) of rDNA collected from the NCBI DNA database. Primers and probes were designed using the Allele ID 7 at default search criteria. Specific probes were labeled with the reporter dyes JOE (6−carboxy−4,5−dichloro−2,7−dimethoxyfluorescein) at the 5' end and HBQ1 quencher at the 3' end (Sigma−Aldrich). The specificity of primers and fluorogenic probes was tested against genomic DNA of P. alni subsp. multiformis, P. lacustris and P. taxon hungarica. The real−time PCR reactions with the specific probes and primers yielded positive results with five concentrations of standards obtained by standard PCR reaction for corresponding Phytophthora species. The negative control (lack of DNA pathogens) yielded no amplification products. Standard curves showed a linear correlation between input DNA and cycle threshold (Ct) values with R² from 0.994 (P. alni) to 0.998 (P. taxon hungarica). The amplification efficiency of target DNA varied from 94.6% (P. alni) to 100% (P. taxon hungarica). The validation of the primers and probes designed for analysed Phytophthora species was performed on pure cultures, on soil samples from the forest nursery and declining oak stands. The designed probes displayed the high specificity of the detection of investigated species in pure cultures. The presented new molecular TaqMan probes can fully assist the integrated pest management as a powerful tool for a quick detection of above pathogenic organisms in forest nurseries. The molecular detection of harmful phytophthoras and in consequences diminishing of fungicides use for their control in forestry fully support European Union directives as well as the ‘Good plant protection practice measures' elaborated by European and Mediterranean Organisation of Plant Protection.
Źródło:
Sylwan; 2016, 160, 05; 365-370
0039-7660
Pojawia się w:
Sylwan
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
    Wyświetlanie 1-2 z 2

    Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies