Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Wyszukujesz frazę "reaction;" wg kryterium: Temat


Tytuł:
Improved method of isolation of total nucleic acids from hop plants and grapevine before the RT-PCR by addition of polyvinylpolypyrrolidone
Usprawniona metoda izolacji calkowitych kwasow nukleinowych z chmielu i winorosli przez RT-PCR przez dodanie poliwinylopolipirolidonu
Autorzy:
Cajza, M
Folkman, W.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65582.pdf
Data publikacji:
2003
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
isolation
total nucleic acid
nucleic acid
hop plant
grapevine
RT-PCR method zob.reverse transcription polymerase chain reaction
addition
polyvinylpolypyrrolidone
reverse transcription polymerase chain reaction
polymerase chain reaction
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2003, 43, 4; 375-380
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Isolation of the DNA fragment reflecting the open reading frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the polymerase chain reaction. IV. The product of the applied technologies
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65915.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
I-18 C gene
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
Opis:
The Polymerase Chain Reaction and other molecular technologies were applied to isolate the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene. This research object was realized and the importance of this result has been discussed in view of the mechanisms of the regulation of gene expression.
Reakcja Łańcuchowa Polimerazy i inne technologie molekularne zostały zastosowane w celu izolacji fragmentu DNA odpowiadającego Otwartej Ramie Odczytu II genu I-18 C. Cel badawczy został zrealizowany i omówiono znaczenie tego wyniku w świetle mechanizmów regulacji ekspresji genu.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Detection of nivalenol and deoxynivalenol chemotypes produced by Fusarium graminearum species complex isolated from barley in Iran using specific PCR assays
Autorzy:
Chehri, K.
Godini, R.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66014.pdf
Data publikacji:
2017
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
detection
nivalenol
deoxynivalenol
Fusarium graminearum
isolation
polymerase chain reaction
barley
trichothecene
Iran
Opis:
In order to identify trichothecenes chemotypes produced by Fusarium graminearum species complex (FGSC) isolated from barley, 68 barley samples were collected from markets in Kermanshah and Hamedan provinces, Iran. Thirty-one Fusarium isolates were obtained from grains and morphologically classified into three species FGSC (14), F. equiseti (9), and F. proliferatum (8). The identification of the members of FGSC was confirmed molecularly using Fg16F/Fg16R primers. Fusarium asiaticum isolates (4) were distinguished from other FGSC using Fg6CTPSf177/Fg16R primers. Polymerase chain reaction-based (PCRbased) detection of mycotoxin-synthesis-pathway gene was also used to determine the potential of the analysed strains to produce deoxynivalenol (DON), 15-acetyldeoxynivalenol (15-AcDON), 3-acetyldeoxynivalenol (3-AcDON), and nivalenol (NIV). Of 14 tested isolates, 10 and 4 isolates belonged to DON and NIV chemotype, respectively. Also, the results of DON chemotype survey using specific primers MinusTri7F/R and Tri315F/R showed 1 and 9 isolates produced 3-AcDON and 15-AcDON, respectively. These results show that DON was the most common chemotype in western Iran. To our knowledge, this is the first report on 15-AcDON, 3-AcDON, and NIV isolated from barley in Iran.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2017, 57, 3
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Diversity of Pseudomonas species associated with soft rot of plants in Poland
Autorzy:
Zolobowska, L
Pospieszny, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65211.pdf
Data publikacji:
2001
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
Pseudomonas fluorescens
Polska
Pseudomonas
polymerase chain reaction
occurrence
Pseudomonas putida
heterogeneity
identification
plant
Opis:
A total of 94 pectolytic and 60 nonpectolytic Pseudomonas isolates were obtained from 250 samples of rotted vegetable specimens representing various economically important vegetables. The isolates were identified on the basis of standard biochemical tests. Pseudomonas fluorescens biovar V and II and Pseudomonas putida were the most abundant species among pectolytic isolates and Pseudomonas fluorescens biovar I among nonpectolytic ones. Only 3 Pseudomonas viridiflava isolates were identified and all of them were obtained from potato. Isolates of pectolytic phenotype were scattered among nonpectolytic ones irrespective of their taxonomical status. Isolates identified biochemically, as Pseudomonas marginalis were also present in nonpectolytic group. PCR method is unsuitable for identification and differentiation of bacteria belonging to pectolytic fluorescens Pseudomonas group due to great diversity of species. However, the results of PCR amplification of the genes encoding pectate lyase suggest that genes responsible for production of this enzyme may also be present in isolates of nonpectolytic phenotype.
Z 250 prób, z różnych gatunków roślin warzywnych z objawami mokrej zgnilizny wyodrębniono 94 izolaty pektynolitycznych i 60 izolatów nie pektynolitycznych bakterii z rodzaju Pseudomonas. Identyfikację i różnicowanie izolatów przeprowadzono przy zastosowaniu standardowych testów fizjologiczno-biochemicznych. Spośród izolatów z grupy pektolitycznych Pseudomonas najliczniej występował gatunek P. fluorescens, który był reprezentowany przez 4 biowary (oprócz czwartego), przy czym dominowały biowary II i V. Mniej licznie występował gatunek P. putida, a P. viridiflava był reprezentowany jedynie przez 3 izolaty, pochodzące z ziemniaka. Podobna była struktura populacji izolatów z grupy niepektolitycznych Pseudomonas. Metoda PCR okazała się być mało przydatna do wykrywania i różnicowania izolatów z grupy pektolitycznych Pseudomonas ze względu na duże ich zróżnicowanie. Amplifikacja DNA metodą PCR wykazała, że geny kodujące enzym liazy pektynowej występują także w izolatach niepektolitycznych rodzaju Pseudomonas.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2001, 41, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Isolation of the DNA fragment reflecting the open reading frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the polymerase chain reaction. II. The technology for the preparation of the template
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65476.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
gene expression
I-18 C gene
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
Opis:
The technology for the preparation of the template in the research aimed to isolate the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene is presented i.e. the linearisation of the template by Bam H I digestion, the purification of the template and the estimation of the template concentration.
Przedstawiono technologię przygotowywania matrycy DNA w badaniach zmierzających do izolacji Otwartej Ramy Odczytu II genu I-18 C Chironomus tentans. Technologia ta obejmowała linearyzację DNA matrycy poprzez trawienie Bam H I oraz oczyszczenie matrycy i oznaczenie stężenia matrycowego DNA.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. II. Preparation of the intermediate vector - bluescript plasmid for ligation with the inserts
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66467.pdf
Data publikacji:
1999
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
cloning
I-18 C gene
plasmid
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
Opis:
The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene in regard to the preparation of the intermediate vector i.e. the bluescript for the ligation with the ORF I and II reflecting DNA fragments, is presented. The main steps include the Eco RV digestion of the bluescript plasmid, the phenol / methylene chloride extraction of the plasmid, dephosphorylation of the bluescript plasmid and finally its extraction with the phenol and ethanol precipitation.
Przedstawiono technologię, którą zastosowano do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających translacyjną otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: przygotowania wektora pośredniego - plazmidu blueskrypt do ligacji z wymienionymi sekwencjami wstawek. Główne etapy obejmują: trawienie plazmidu blueskrypt enzymem Eco RV, ekstrakcję plazmidu fenolem/ chlorkiem metylenu, defosforylację plazmidu blueskrypt, ostatecznie jego oczyszczenie poprzez ekstrakcję fenolową i precypitację etanolem.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Construction of new GFP-tagged fusants for Trichoderma harzianum with enhanced biocontrol activity
Autorzy:
Kowsari, M.
Motallebi, M.
Zamani, R.M.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66878.pdf
Data publikacji:
2014
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
biomonitor
construction
Trichoderma harzianum
biological control
green fluorescent protein
real-time polymerase chain reaction
Opis:
Trichoderma is one of the most exploited biocontrol agents for the management of plant diseases. In biocontrol ecology, the critical factors are detection, and the monitoring and recovery of specific biocontrol agents either naturally present or deliberately released into the environment. Protoplast fusion is an appropriate tool for the improvement of biocontrol Trichoderma strains. Protoplast isolation from Trichoderma harzianum was achieved using 24 h culture age, 6.6 mg/ml Novazym L 1412 at 30°C which resulted the maximum protoplast yield of 5 × 108/ml. The self-fused protoplasts were regenerated and 12 fusants were selected based on their growth rate on 2% colloidal chitin medium. Next, a comparison was done for chitinase and antagonistic activity. Transcriptomic analysis based on quantitative real-time RT-PCR, demonstrated that T8-05 fusant expressed 1.5 fold of chit42 transcript as compared with the parental line. This fusant with 7.02±0.15U chitinase activity showed a higher growth inhibition rate (100%) than the parent strain, against Rhizoctonia solani. To obtain a genetically marked fusant that can be used as a biomonitor, the fusant was cotransformed with the gfp and amdS genes. The morphology and viability of selected cotransformant (FT8-7MK-05-2) was similar to the parent. Green fluorescing conidia were observed within the first 2 days of incubation in the soil, and this was followed by the formation of chlamydopores after 60 days. The colonisation of the gfp-tagged fusant was also monitored visually on R. solani sclerotia by scanning electron microscopy. Production of gfp-tagged fusant of Trichoderma spp. provides a potentially useful tool for monitoring hyphal growth patterns and the population of biocontrol agent isolates introduced into environmental systems.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2014, 54, 2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Isolation of the DNA fragment reflecting the open reading frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the polymerase chain reaction. V. Different mechanisms of regulation regarding the open reading frames
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/64980.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
regulation mechanism
gene expression
I-18 C gene
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
Opis:
Different mechanisms of regulation regarding the Open Reading Frames (ORFs) have been discussed to have a broader perspective that is necessary to evaluate the role of the ORFs of the I-18 C gene. This consideration includes the ORF II of the I-18 C gene which is the object of the presented research.
Omówiono różnorodne mechanizmy regulacji dotyczące Otwartych Ram Odczytu, w celu wytworzenia szerszego spojrzenia na to zagadnienie, które jest potrzebne do oceny roli poszczególnych Otwartych Ram Odczytu (ORF) genu I-18 C. Omówienie to dotyczy również ORF II genu I-18 C, co było przedmiotem zaprezentowanych badań.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
The use reverse transcription and polymerase chain reaction [RT-PCR] for the detection of hop latent viroid [HLVd]
Autorzy:
Cajza, M
Wypijewski, K.
Pospieszny, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65773.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
hop latent viroid
reverse transcription
viroid
hop
plant pathogen
polymerase chain reaction
detection
DNA amplification
Opis:
The simple method of nucleic acids extraction, based on guanidine thiocyanate extraction buffer, was sufficient for obtaining a good templates for RT-PCR. The RT-PCR reactions were performer from the start to the end (both the reverse transcription and the HLVd-cDNA amplification) in the same reaction mixture and in the very small volume of reaction (10 μI). Both pairs of primers designed by authors were good for reverse transcription and later for amplification of the HLVd-cDNA. The presence of gelatin as a stabilizer of DNA polymerase was indispensable for successful performance of RT-PCR.
Wiroidy, najmniejsze obecnie znane patogeny roślin, zbudowane z pojedynczej nici kolistego RNA, nie zawierające w swej budowie i nie kodujące żadnych białek, są groźnymi patogenami roślin wyższych, rozpowszechnionymi we wszystkich rejonach świata, szczególnie w uprawach roślin rozmnażanych wegetatywnie. Wiroid latentny chmielu (ang. hop latent viroid - HLVd) został wykryty dopiero w 1988 roku w chmielu. Do tej pory odnotowano go w rejonach uprawy chmielu na całym świecie. Chmiel, jedyny znany żywiciel tego patogena, ulega tylko infekcjom utajonym (latentnym). HLVd powoduje zarówno spadek masy plonu szyszek jak i zawartości alfa-kwasów w szyszkach. Bezobjawowe infekcje oraz brak białek strukturalnych i innych produktów translacji powodują, że obecnie patogena tego można wykrywać tylko przy pomocy elektroforezy (metoda bardzo zawodna, wymagająca wysokiego stężenia RNA patogena w tkance), sond hybrydyzacyjnych i rozwijanej w ostatnich latach metody RT-PCR. Podczas opracowywania RT-PCR do wykrywania HLVd w ekstraktach kwasów nukleinowych wykorzystywano dwie pary primerów specyficznych dla sekwencji nukleotydowej HLVd, charakteryzujących się różnymi temperaturami topnienia produktu. Wiroida wykrywano w ekstraktach kwasów nukleinowych z blaszek liściowych i z ogonków liściowych chmielu. Uproszczona metoda guanidynowa do izolacji totalnych kwasów nukleinowych okazała się wystarczająca do przeprowadzenia reakcji RT-PCR. Opracowana metoda charakteryzowała się bardzo dużą czułością, specyficznością (produkty amplifikacji cDNA-HLVd uzyskiwano tylko z próbek materiału roślinnego pochodzącego z roślin zawierających tego wiroida) i szybkością wykonania (dwa dni łącznie z ekstrakcją kwasów nukleinowych). Ponadto w zastosowanej metodzie opracowano warunki do przeprowadzenia zarówno odwrotnej transkrypcji i następnie amplifikacji powstałego cDNA wiroida w jednej probówce, w tej samej mieszaninie reakcyjnej . Oprócz tego wszystkie reakcje RT-PCR prowadzono w bardzo małej objętości równej 10 μl (2 μl zawiesiny kwasów nukleinowych i 8 μl mieszaniny reakcji RT-PCR). Maksymalne uproszczenie metody, wielokrotne obniżenie kosztów reakcji oraz charakterystyczna dla RT-PCR czułość, specyficzność i szybkość przeprowadzenia testu sprawiają, że może być ona wykorzystywana do rutynowego wykrywania nie tylko HLVd ale również innych wiroidów, wirusoidów i wirusów RNA.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Some evidence for skewed mating type distribution in Iranian populations of Rhynchosporium commune, the cause of barley scald disease
Autorzy:
Arzanlou, M.
Karimi, K.
Mirabi, F.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66749.pdf
Data publikacji:
2016
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
mating type
distribution
Rhynchosporium commune
barley
scald disease
foliar disease
scald
multiplex polymerase chain reaction
Opis:
Rhynchosporium commune (formerly known as Rhynchosporium secalis), the causal agent of scald disease on barley, is known to spread asexually by splash dispersed conidia. However, there are multiple lines of evidence for the possibility of a clandestine sexual cycle occurrence in this species including extensive genotypic diversity, equal distribution of mating type alleles across the world and expression of mating type genes. In the current study, the potential for the occurrence of a sexual cycle amongst the Iranian population of R. commune was assessed by analyzing distribution and frequency of the mating type alleles at both micro and macrospatial scales. A total of 95 single-conidial R. commune isolates were obtained from different barley fields in Kurdistan province. Previously designed primers were applied in a multiplex PCR assay to study distribution and frequency of the mating type alleles within and between populations. Totally, 67 isolates were determined as MAT1-1 and the remaining 28 isolates as MAT1-2 throughout the sampling counties. The results obtained at a macro-spatial scale revealed that unlike Kamyaran county (both MAT1-1 and MAT1-2 at an equal ratio), an unequal distribution of mating type genes was dominant among R. commune isolates in both Mariwan and Dehgolan counties. Our findings support a predominantly asexual reproduction for Mariwan and Dehgolan counties and the possibility of sexual stage occurrence in Kamyarna county.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2016, 56, 3
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Isolation of the DNA fragment reflecting the open reading frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the polymerase chain reaction. III. The DNA amplification technology
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66760.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
gene expression
I-18 C gene
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
DNA amplification
Opis:
The technology used to amplify and isolate the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans is described i.e. the Polymerase Chain Reactioin and the agarose gel electrophoresis of this reaction product, as well as the blunting reaction of the product and its isolation.
Opisano technologię zastosowaną do powielenia i izolacji fragmentu DNA odpowiadającego Otwartej Ramie Odczytu II genu I-18 C Chironomus tentans, tj. Reakcję Łańcuchową Polimerazy (PCR) oraz elektroforezę w żelu agarozowym produktu tej reakcji jak również reakcję tzw. Stępiania końców wyżej wymienionego produktu i ostatecznie jego izolację .
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Identification and characterization of Pseudomonas syringae pv. syringae strains from various plants and geographical regions
Autorzy:
Khezri, M.
Mohammadi, M.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65669.pdf
Data publikacji:
2018
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
identification
Pseudomonas syringae pv.syringae
plant
phenotype
polymerase chain reaction
protein profile
plasmid
syringomycin
geographic region
Opis:
Pseudomonas syringae pv. syringae (Pss) constitutes a diverse group of bacterial strains that cause canker of stone fruits, blight of cereals and red streak of sugarcane. The purpose of this study was to determine how diverse Iranian strains of Pss are when they come from different hosts. We compared a total of 32 Pss strains isolated from stone fruits, barley, wheat and sugarcane from different geographical regions of Iran based on their phenotypic and molecular properties. Strains showed some variation regarding carbon and nitrogen utilization. Pss strains were similar in their protein banding patterns. Additional bands were found in sugarcane strains. Most strains showed one indigenous plasmid DNA and a few had two and some none. The genes of syrB and syrD encoding syringomycin synthesis and secretion, respectively, were amplified using specific primers in polymerase chain reaction. Syringomycin, producing strains amplified two DNA fragments of 752 and 446 bp representing syrB and syrD genes, respectively. Primer specificity was shown for Pss using various genera. Based on the results of this study, it is suggested that Pss strains from different hosts and geographical regions show diversity in phenotypic and molecular characters. It is thought that phenotypic variation is due to adaptation to specific hosts and niches for survival and pathogenicity.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2018, 58, 4
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Isolation of the DNA fragment reflecting the open reading frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the polymerase chain reaction. I. The technology for the preparation of the primers
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65836.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
phosphorylation
plant protection
I-18 C gene
purification
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
oligonucleotide
Opis:
The above mentioned technology in a case of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene is described i.e. the primers design, purification and phosphorylation of the oligonucleotide primers.
Dla określonego w tytule pracy, celu badań przedstawiono technologię przygotowywania starterów, w przypadku DNA odpowiadającego Otwartej Ramie Odczytu II genu I-18 C Chironomus tentans. Technologia ta obejmowała zaprojektowanie starterów dla PCR oraz oczyszczenie i fosforylację zsyntetyzowanych oligonukleotydowych starterów.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Identification of Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis by the polymerase chain reaction [PCR]
Autorzy:
Cajza, M
Rezler, A.
Pospieszny, H.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65945.pdf
Data publikacji:
1997
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
tomato seed
pathogen
Clavibacter michiganensis
plant protection
bacteria
polymerase chain reaction
detection
DNA amplification
seed
identification
Opis:
The PCR offers the possibility of specific and very sensitive detection and/or identification of Cl. m. subsp. michiganensis in seeds. The described PCR method for identification of this pathogen is very fast (one day) and economical, because of the very small volume (10 μI) of the PCR reaction mixture. The method based on amplification of the bacterial plasmid DNA fragment may be very useful in routine identification of Cl. m. subsp. michiganensis from all other bacteria isolated from tomato seeds and may be an alternative tool in diagnostics, especially for the quarantine services.
Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis jest bardzo groźnym patogenem kwarantannowym pomidora, wywołującym chorobę zwaną bakteryjnym rakiem pomidora. Bakteria ta łatwo przenosi się z zakażonymi nasionami i sadzonkami. Pomimo opracowania różnych technik diagnostycznych do jej wykrywania, nadal stanowi duży problem w diagnozowaniu chorób pomidora. Powszechnie stosowane w Polsce wykrywanie tej bakterii, bazujące na testach enzymoimmunologicznych (ELISA), immunofluorescencyjnych, hodowli na pożywkach półselektywnych i testach biologicznych, jest często zawodne ze względu na duże serologiczne zróżnicowanie poszczególnych szczepów tej bakterii, obecność wielu bakterii saprofitycznych, tworzących kolonie nie różniące się morfologicznie od kolonii właściwych dla Cl. m. subsp. michiganensis, czy też mało przydatne ze względu na długi czas trwania testu i obecność infekcji latentnych. Jedną z nowoczesnych metod wykrywania i identyfikacji bakterii jest amplifikacja fragmentów DNA charakterystycznych dla jej genomu przy pomocy reakcji PCR. Metoda ta dopiero zaczyna być powszechnie stosowana w diagnostyce bakterii (nieliczne doniesienia, w większości z ostatnich trzech lat). Opracowana metoda identyfikacji Cl. m. subsp. michiganensis spośród różnych bakterii saprofitycznych obecnych na nasionach pomidora, charakteryzuje się bardzo dużą czułością (do wykrycia Cl. m. subsp. michiganensis wystarczy 200-300 bakterii / 1 ml), specyficznością (produkty amplifikacji DNA bakteryjnego o oczekiwanej długości 614 bp, uzyskiwano tylko w próbkach, w których znajdował się DNA z Cl. m. subsp. michiganensis) oraz szybkością (jeden dzień, wraz z izolacją DNA bakteryjnego). Ponadto opracowana metoda charakteryzuje się bardzo niskimi kosztami, gdyż cala reakcja amplifikacji DNA zachodzi w objętości 10 μI (4 μI zawiesiny DNA i 6 μI mieszaniny reakcyjnej), co sprawia, że stosowanie tej metody w powszechnej diagnostyce chorób bakteryjnych będzie coraz częstsze i będzie ona coraz bardziej konkurencyjna w stosunku do innych, obecnie stosowanych.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1997, 37, 1-2
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
A simple method for extracting DNA from rhododendron plants infected with Phytophthora spp. for use in PCR
Autorzy:
Trzewik, A.
Nowak, K.J.
Orlikowska, T.
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66480.pdf
Data publikacji:
2016
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
simple method
DNA extraction
rhododendron
leaf
plant infection
Phytophthora
polymerase chain reaction
detection
real-time PCR method
Opis:
Among the numerous protocols that describe the extraction of DNA, those relating to the isolation of DNA from infected plants, are rare. This study describes a rapid and reliable method of extracting a high quality and quantity of DNA from rhododendron leaves artificially infected with Phytophthora cactorum, P. cambivora, P. cinnamomi, P. citrophthora, and P. plurivora. The use of the modified Doyle and Doyle protocol (1987) allowed us to obtain high quantity and quality DNA (18.26 μg from 100 mg of the fresh weight of infected leaves at the ratios of A260/280 and A260/230 – 1.83 and 1.72, respectively), suitable for conventional polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR amplifications.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 2016, 56, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł

Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies