Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

English (EN)·Polski (PL)·Yкраїнський (UK)
Przejdź do strony domowej biblioteki Centralna Biblioteka Wojskowa Link otwiera się w nowym oknie Logo biblioteki Prolib Integro - strona głównaCentralna Biblioteka Wojskowa

Wyszukujesz frazę "DNA Cloning" wg kryterium: Temat

  Lista filtrów
Wyrównaj
    Wyświetlanie 1-13 z 13
    Tytuł:
    Isolation and preliminary sequence characterization of beta-amylase gene promoters in rye [Secale cereale L.]
    Autorzy:
    Sadowski, J
    Rorat, T
    Cooke, R
    Delseny, M
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/2046684.pdf
    Data publikacji:
    1997
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    beta-amylase
    rye
    gene promoter
    homology
    amino acid
    DNA cloning
    prolamin
    Secale cereale
    mRNA
    embryogenesis
    endosperm
    cDNA
    inverse polymerase chain reaction
    Opis:
    The isolation of rye ß-Amy1 and ß-Amy2 gene promoters from nuclear DNA using the inverse polymerase chain reaction (IPCR) technique and characterization of their sequences are presented. The conservation of ß-amylasc coding sequences allowed for simultaneous IPCR amplification of two different promoters with primers designed on the basis of the single known cDNA sequence. Two ß-amylasc gene promoters display a low sequence similarity (47%). Beside consensus TATA and CCAAT boxes, other sequence motives common to both promoters were found. In addition, the homology of amino acid sequences of plant ß-amylases available in the database is discussed.
    Źródło:
    Journal of Applied Genetics; 1997, 38, 3; 241-251
    1234-1983
    Pojawia się w:
    Journal of Applied Genetics
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of a Rift Valley Fever fusion gene in a plant virus derived replicon vector
    Autorzy:
    Omosimua, Rebecca Oziohu
    Iyappan, Gowtham
    Obembe, Olawole
    Ogunkanmi, Adebayo
    Sathishkumar, Ramalingam
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/1193478.pdf
    Data publikacji:
    2021
    Wydawca:
    Przedsiębiorstwo Wydawnictw Naukowych Darwin / Scientific Publishing House DARWIN
    Tematy:
    DNA Cloning
    Escherichia coli DH5α cells
    PBYR2e3K2Mc-GFP
    PBYR2e3K2Mc-RVFV
    RVF disease
    RVFV fusion gene
    bean yellow dwarf derived vector
    emerging disease
    geminivirus vector
    zoonotic disease
    Opis:
    Rift Valley fever (RVF) disease is an emerging viral zoonotic disease caused by Rift Valley fever virus (RVFV). RVF disease is seemingly becoming more severe in endemic populations and in areas of new outbreak. RVF disease is listed by WHO as requiring urgent research and development attention. There is no therapeutics or licensed vaccine for human use in the case of an eventual outbreak. There is a need to clone RVFV genes in cloning vectors which may be useful to produce antigens in plant cells or may be tested directly as DNA vaccines. A synthesized Rift Valley fever virus fusion gene was cloned in a bean yellow dwarf virus derived replicon vector; PBYR2e3K2Mc-GFP by removing and replacing the GFP gene. The cloned PBYR2e3K2Mc-RVFV fusion gene was confirmed by PCR, restriction digestion and DNA sequencing. This cloned RVFV fusion gene in plant virus vector can be used for subsequent protein expression in plants cells or used directly tested as DNA vaccines in future studies.
    Źródło:
    World Scientific News; 2021, 158; 159-172
    2392-2192
    Pojawia się w:
    World Scientific News
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. II. Preparation of the intermediate vector - bluescript plasmid for ligation with the inserts
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66467.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    cloning
    I-18 C gene
    plasmid
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    DNA fragment
    Opis:
    The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene in regard to the preparation of the intermediate vector i.e. the bluescript for the ligation with the ORF I and II reflecting DNA fragments, is presented. The main steps include the Eco RV digestion of the bluescript plasmid, the phenol / methylene chloride extraction of the plasmid, dephosphorylation of the bluescript plasmid and finally its extraction with the phenol and ethanol precipitation.
    Przedstawiono technologię, którą zastosowano do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających translacyjną otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: przygotowania wektora pośredniego - plazmidu blueskrypt do ligacji z wymienionymi sekwencjami wstawek. Główne etapy obejmują: trawienie plazmidu blueskrypt enzymem Eco RV, ekstrakcję plazmidu fenolem/ chlorkiem metylenu, defosforylację plazmidu blueskrypt, ostatecznie jego oczyszczenie poprzez ekstrakcję fenolową i precypitację etanolem.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. VI. The DNA sequencing of the cloned inserts
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66720.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    DNA sequence
    pET-3a vector
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    expression
    DNA fragment
    Opis:
    The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments in regard to the DNA sequencing of the cloned inserts, is presented. The object of the DNA sequencing of the cloned inserts, was to finally confirm and prove the sequence of the inserts as the sequence of the ORF I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene of Chironomus tentans.
    Przedstawiono technologię, zastosowaną do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie sekwencjonowania sklonowanych wstawek. Celem sekwencjonowania DNA sklonowanych wstawek było ostateczne potwierdzenie i udowodnienie, że sekwencje wklonowanych wstawek były sekwencjami fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning and expression of the two DNA fragments of the I-18 C region of Chironomus tentans. II. The effects of the applied technology
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66157.pdf
    Data publikacji:
    1998
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    DNA fragment
    Opis:
    The chromosomal I-18 C region of Chironomus tentans contains the I-18 C gene. Two different open reading frames (i.e. the ORF I and II) of two different transcripts (i.e. the 1.8 kb and 4.6 kb RNA) of the I-18 C gene of Chironomus tentans were isolated, at the DNA level, by the Polymerase Chain Reaction, then were cloned into the bluescript vector and finally were cloned into the pET-3a vector in order to translate them in T7 RNA polymerase / promoter system of E. coli. It was possible to obtain the ORF I overexpressed. In a case of the ORF II the low molecular weight polypeptide was detected, however it was not overexpressed, but still this polypeptide was strongly visible on the SDS-polyacrylamide gel.
    Region chromosomalny I-18 C Chironomus tentans zawiera gen I-18 C. Dwie odrębne otwarte ramy odczytu (tj. ORF I i II) genu I-18 C Chironomus tentans zostały wyizolowane, na poziomie DNA, przy użyciu Reakcji Łańcuchowej Polimerazy (PCR), a następnie zostały wklonowane do wektora blueskrypt i ostatecznie zostały wklonowane do wektora pET-3a w celu ich translacji w systemie promotora T7 RNA polimerazy w E. coli. Uzyskano bardzo dużą ekspresję ORF I. W przypadku ORF II wykryto obecność polipeptydu o niskiej masie cząsteczkowej i chociaż nie uzyskano jego bardzo dużej ekspresji, tym niemniej polipeptyd ten był silnie widoczny w żelu poliakryloamidowym z SDS.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1998, 38, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    High throughput protein production
    Autorzy:
    Tworak, A.
    Podkowinski, J.
    Figlerowicz, M.
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/80317.pdf
    Data publikacji:
    2011
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    activity
    cloning
    DNA sequencing
    expression
    high throughput
    human genome
    Human Genome Project
    large scale proteomics
    new technology
    protein folding
    protein production
    purification
    Źródło:
    BioTechnologia. Journal of Biotechnology Computational Biology and Bionanotechnology; 2011, 92, 2
    0860-7796
    Pojawia się w:
    BioTechnologia. Journal of Biotechnology Computational Biology and Bionanotechnology
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning and expression of two DNA fregments of the I-18 C region of Chironomus tentans. I. The scheme of the performed experiments and the applied technology
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/65883.pdf
    Data publikacji:
    1998
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    expression
    pET vector
    DNA fragment
    Opis:
    The I-18 C region of the polytenic chromosome of Chironomus tentans contains the I-18 C gene. Two DNA fragments, reflecting two different open reading frames (i.e.ORF I and II) of two different transcripts (i.e. 1.8 and 4.6 kb RNA) of the I-18 C gene were isolated, then were cloned into the intermediate vector and next to the final vector in order to translate them in T7 RNA polymerase / promoter system. The translation of the ORF I and II was performed to obtain the polypeptides of these ORFs for further study. Here, the scheme of the performed experiments and the applied technology that were necessary to realize the goal of this research, are presented.
    Region i-18 C chromosomu politenicznego Chironomus tentans zawiera gen I-18 C. Dwa fragmenty DNA, odzwierciedlające dwie różne otwarte ramy odczytu (tj. ORF I i ORF II) dwóch różnych transkryptów (tj. 1.8 i 4.6 kpz RNA) genu I-18 C, zostały wyizolowane i następnie wklonowane do wektora pośredniego, a potem do wektora końcowego, w celu ich translacji w systemie promotora T7 RNA polimerazy. Translacja ORF I i ORF II była wykonana w celu uzyskania polipeptydów określonych przez te ORF do dalszych badań. W niniejszej pracy przedstawiono schemat wykonanych eksperymentów i zastosowaną technologię, która była potrzebna do zrealizowania celu badań.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1998, 38, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. V. Identification of the bacterial colonies, containing the recombinant bluescript plasmids
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/65003.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    pET-3a vector
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    plasmid
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    DNA fragment
    identification
    Opis:
    The technology applied for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments in regard to the identification of the bacterial colonies, of E. coli XL-1 strain, containing the recombinant bluescript plasmids, is described. The particular steps include: the α-complementation test, growing of the preliminary selected bacterial colonies in culture, isolation of the plasmids from these colonies, the Nde I and Bam HI digestion of the plamids mini-preparations, analysis of the digestion products and the identification of the bacterial colonies, containing the bluescript plasmids with the cloned inserts by the agarose gel electrophoresis (2% gel, 1 x TBE buffer).
    Opisano technologię zastosowaną do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans, w zakresie: identyfikacji kolonii bakteryjnych szczepu XL-1, zawierających zrekombinowane plazmidy blueskrypt. Poszczególne etapy obejmowały: test α-komplementacji, hodowlę wstępnie wybranych kolonii bakteryjnych, izolację plazmidów bakteryjnych poszczególnych kolonii z tych hodowli, trawienie mini-izolatów plazmidów Nde I i Bam HI, analizę produktów trawienia i identyfikację kolonii bakteryjnych, zawierających plazmidy blueskrypt z wklonowanymi wstawkami przy zastosowaniu elektroforezy w żelu agarozowym (2% żel, 1 x stężony bufor TBE).
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. IV. The ligation of the bluescript vector with the inserts
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/65392.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    pET-3a vector
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    expression
    DNA fragment
    Opis:
    The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene in regard to the ligation reactions of the bluescript vector with the inserts, is presented. The main steps include: the calculation of the molar ratio of the bluescript plasmid to the ORF I and II reflecting DNA fragments as the inserts, the ligation reaction, the transformation of the E. coli cells of the XL- 1 strain with the ligation reactions products and growing of the transformed bacterial cells.
    Przedstawiono technologię użytą do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: reakcji ligacji wektora blueskrypt ze wstawkami sekwencji klonowanych wymienionych wyżej. Przedstawione główne etapy obejmują: obliczenie stosunku molarnego plazmidu blueskrypt do fragmentu DNA odzwierciedlającego otwartą ramę odczytu I i II. Fragmenty te zostały użyte jako wstawki. Przedstawiono także zastosowaną technologię dotyczącą reakcji ligacji, transformacji komórek bakteryjnych E. coli szczepu XL-1 produktami reakcji ligacji oraz hodowlę na płytkach agarowych stransformowanych komórek bakterii.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. VII. The preparation of the inserts and the translational vector - pET-3a for ligation
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66798.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    pET-3a vector
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    expression
    DNA fragment
    Opis:
    The technology applied for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments in regard to the preparation of the inserts and the translational vector pET-3a for ligation, is described. The main steps of the preparation of the inserts include: digestion of the isolated recombinant bluescript plasmids, carrying the inserts, with the Nde I and Bam HI, purification and isolation of the inserts after the digestion, by the preparative agarose gel electrophoresis (2% gel, 1 x TAE buffer) and then by the centrifugation through the filtration device of the isolated DNA fragment from the gel and also estimation of the inserts concentration by the agarose gel electrophoresis (2% gel, 1 x TBE buffer). The main steps of the preparation of the pET-3a vector included: transformation of the competent E. coli cells of the XL-1 strain with the pET-3a, growing of the transformed bacteria on agar plates (with ampicillin) and then growing of the isolated transformed bacterial colonies in culture to finally isolate the plasmid, digestion of the plasmid with the Nde I and Bam HI, purification of the isolatcd plasmid, after the digestion, by the preparative agarose gel electrophoresis (0.8% gel, 1 x TAE buffer), centrifugation through the filtration device of the isolated DNA fragment from the gel, phenol extraction of the isolated plasmid, estimation of the concentration of the plasmid by the agarose gel electrophoresis (0.8% gel, 1 x TBE buffer).
    Opisano technologię zastosowaną do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II w zakresie przygotowania wstawek i wektora translacyjnego - pET-3a do ligacji. Główne etapy przygotowania wstawek obejmowały: - trawienie Nde I i Bam HI, wyizolowanych rekombinacyjnych plazmidów blueskrypt, które zawierały wstawki, - oczyszczanie i izolację wstawek, po trawieniu przy użyciu preparatywnej elektroforezy w żelu agarozowym (2% żel, 1 x stężony bufor TAE) i następnie przez odwirowanie wyizolowanego fragmentu DNA z żelu, przy użyciu urządzenia filtracyjnego - oraz ocenę stężenia wstawek przy użyciu elektroforezy (2% żel, 1 x stężony bufor TBE). Główne etapy przygotowania wektora pET-3a obejmowały: transformację komórek kompetentnych E. coli szczepu XL-1, wektorem pET-3a, hodowlę stransformowanych komórek bakteryjnych na płytkach agarowych (z ampicyliną) i następnie hodowlę w kulturze wyizolowanych stransformowanych komórek bakteryjnych w celu izolacji plazmidu, trawienie wyizolowanego plazmidu Nde I i Bam HI oraz jego oczyszczenie po trawieniu, przy użyciu preparatywnej elektroforezy w żelu agarozowym (0.8% żel, 1 x stężony bufor TAE), odwirowanie wyodrębnionego z żelu fragmentu DNA przy zastosowaniu urządzenia filtracyjnego, ekstrakcję fenolową wyizolowanego plazmidu, ocenę stężenia plazmidu przy użyciu elektroforezy w żelu agarozowym (0.8% żel, 1 x stężony TBE).
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. III. Preparation of the inserts for ligation with the bluescript and the modification of the vector
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66473.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    cloning
    pET-3a vector expression
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    promotor system
    polymerase chain reaction
    bluescript vector
    DNA fragment
    Opis:
    The technology applied for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene of Chironomus tentans in regard to the preparation of the inserts for ligation with the bluescript and the modification of this intermediate vector, is described. The ORF I reflecting DNA fragment prepared for ligation with the bluescript vector, had one end blunt (i.e. the 5’ end with the Nde I restriction site) and the second end was sticky (i.e. the 3’ end after the Bam HI digestion of this insert). Subsequently, the bluescript vector for this ligation had also one end blunt (i.e. the 5’ end with the Nde I restriction site) and the second end was sticky (i.e. the 3’ end after the Bam HI digestion). The ORF II reflecting DNA fragment prepared for the ligation had both ends blunt and so the vector.
    Opisano technologię zastosowaną do klonowania fragmentów DNA, odzwierciedlających translacyjną otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C w zakresie przygotowania wstawek do ligacji z plazmidem blueskrypt i niezbędnych modyfikacji wektora pośredniego. Fragment DNA odzwierciedlający otwartą ramę odczytu (ORF) I przygotowano do ligacji z wektorem blueskrypt w ten sposób, że fragment ten posiadał jeden koniec tępy (tj. koniec 5’ z miejscem restrykcyjnym dla Nde I) i drugi koniec lepki (tj. koniec 3’ po trawieniu tej wstawki Bam HI). Także wektor blueskrypt, użyty do ligacji ze wspomnianą sekwencją wstawki, miał jeden koniec tępy (tj. koniec 5’ z miejscem restrykcyjnym dla Nde I) i drugi koniec lepki (tj. koniec 3’ po trawieniu Bam HI). Fragment DNA odzwierciedlający ORF II, przygotowany do ligacji z wektorem blueskrypt, miał oba końce tępe i stosownie do tego oba końce wektora były też tępe.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. I. Preparation of the bacterial cells, transformation and isolation of the bluescript plasmid
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66849.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    transformation
    promoter system
    gene expression
    cloning
    I-18 C gene
    isolation
    T7 RNA polymerase
    plasmid
    Chironomus tentans
    bacterial cell
    polymerase chain reaction
    DNA fragment
    Opis:
    The technology applied for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene of Chironomus tentans in regard to the preparation of the competent E. coli cells of the XL-1 strain needed for the transformation with the ligation reaction products, is presented. Also the transformation of these bacterial cells with the bluescript plasmid and its isolation for these cloning experiments, are described.
    Opisano technologię, którą zastosowano do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających translacyjną otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: przygotowania kompetentnych komórek E. coli szczepu XL-1, poddawanych następnie transformacji produktami reakcji ligacji. Przedstawiono także zastosowaną technologię transformacji wymienionych komórek bakteryjnych przy użyciu plazmidu - blueskrypt oraz izolację tego plazmidu, w celu jego zastosowania w wymienionych eksperymentach klonowania.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
    Tytuł:
    Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. VIII. The ligations of the inserts with the pET-3a vector and the identification of the bacterial colonies, containing the recombinant plasmids
    Autorzy:
    Borowicz, B P
    Powiązania:
    https://bibliotekanauki.pl/articles/66584.pdf
    Data publikacji:
    1999
    Wydawca:
    Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
    Tematy:
    pET-3a vector
    promoter system
    cloning
    I-18 C gene
    T7 RNA polymerase
    Chironomus tentans
    polymerase chain reaction
    expression
    DNA fragment
    recombinant plasmid
    identification
    Opis:
    The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments in regard to the ligations of the inserts with the pET-3a vector and the identification of the bacterial colonies, containing the recombinant plasmids, is presented. The main steps include: calculation of the molar ratios of the vector to insert DNA, the ligation reactions, transformation of the competent E. coli cells of the XL-1 strain, isolation of the plasmids, digestion of the plasmid preparations with the Nde I and Bam HI to indicate the presence of the inserts cloned into the plasmids, using the agarose gel electrophoresis (2% gel, 1 x TBE buffer) of the plasmids samples, with the released inserts, after the digestion, transformation of the competent BL21 (DE3) cells of E. coli with the isolated recombinant plasmids, identification of the bacterial cells, carrying the pET-3a plasmids with the cloned inserts and the storage of these cells.
    Przedstawiono technologię użytą do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie ligacji wstawek z wektorem pET-3a oraz identyfikacji kolonii bakteryjnych, zawierających rekombinacyjne plazmidy. Główne etapy obejmują: obliczenie stosunków molarnych wektora do DNA wstawki, reakcje ligacji, transformację komórek kompetentnych E. coli szczepu XL-1, izolację plazmidów, trawienie preparatów plazmidów Nde I i Bam Hl w celu wskazania obecności wklonowanych do plazmidów wstawek, uwolnionych z tych plazmidów poprzez trawienie wymienionymi enzymami restrykcyjnymi. Analizę produktów trawienia poszczególnych próbek plazmidów wykonano przy użyciu elektroforezy w żelu agarozowym (2% żel, 1 x stężony bufor TBE). Następne etapy to transformacja komórek kompetentnych E. coli BL21(DE3) preparatami wyizolowanych zrekombinowanych plazmidów pET-3a i identyfikacja komórek bakteryjnych, zawierających plazmidy pET-3a z wklonowanymi wstawkami oraz przechowywanie tych komórek.
    Źródło:
    Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
    1427-4345
    Pojawia się w:
    Journal of Plant Protection Research
    Dostawca treści:
    Biblioteka Nauki
    Artykuł
      Wyświetlanie 1-13 z 13

      Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies