Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Wyszukujesz frazę "plasmid DNA" wg kryterium: Temat


Wyświetlanie 1-12 z 12
Tytuł:
High efficiency method to obtain supercoiled DNA with a commercial plasmid purification kit
Autorzy:
Carbone, Antonietta
Fioretti, Flavia
Fucci, Laura
Ausió, Juan
Piscopo, Marina
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1039748.pdf
Data publikacji:
2012
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
midi preparation
supercoiled plasmid isoform
plasmid purification
Qiagen kit
Plasmid DNA
Opis:
Supercoiled state corresponds to the active form for plasmid applications. The relaxed circular form of plasmids is often inactive or poorly active. To obtain significant amounts of almost fully supercoiled DNA, we modified the standard protocol of a commercially available Qiagen plasmid purification kit. Our changes led to isolation of almost 100% of the plasmids in the supercoiled state. The modified protocol was used to purify different plasmids with consistent results. The purified plasmids maintain supercoiled state for about two months. The modified protocol is very advantageous because it allows easy DNA production with high degree of supercoiled form at low cost.
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 2012, 59, 2; 275-278
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
The role of actin and microtubule networks in plasmid DNA intracellular trafficking
Autorzy:
Ondřej, Vladan
Lukášová, Emilie
Falk, Martin
Kozubek, Stanislav
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1041059.pdf
Data publikacji:
2007
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
cytoplasmic trafficking
microtubules
plasmid DNA-lipid complexes
actin filaments
Opis:
This work is focused on the function of the microtubule and actin networks in plasmid DNA transport during liposomal transfection. We observed strong binding of plasmid DNA-lipid complexes (lipoplexes) to both networks and directional long-range motion of these lipoplexes along the microtubules. Disruption of either of these networks led to the cessation of plasmid transport to the nucleus, a decreased mobility of plasmids, and accumulation of plasmid DNA in large aggregates at the cell periphery. Our findings show an indispensable but different role of both types of cytoskeleton, actin and microtubular, in the processes of gene delivery.
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 2007, 54, 3; 657-663
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Improved downstream process for the production of plasmid DNA for gene therapy
Autorzy:
Urthaler, Jochen
Buchinger, Wolfgang
Necina, Roman
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1041381.pdf
Data publikacji:
2005
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
plasmid DNA
production
gene- therapy
purification
alkaline lysis
chromatography
Opis:
Gene therapy and genetic vaccines promise to revolutionize the treatment of inherited and acquired diseases. Since viral vectors are generally associated with numerous disadvantages when applied to humans, the administration of naked DNA, or DNA packed into lipo- or polyplexes emerge as viable alternatives. To satisfy the increasing demand for pharmaceutical grade plasmids we developed a novel economic downstream process which overcomes the bottlenecks of common lab-scale techniques and meets all regulatory requirements. After cell lysis by an in-house developed gentle, automated continuous system the sequence of hydrophobic interaction, anion exchange and size exclusion chromatography guarantees the separation of impurities as well as undesired plasmid isoforms. After the consecutive chromatography steps, adjustment of concentration and final filtration are carried out. The final process was proven to be generally applicable and can be used from early clinical phases to market-supply. It is scaleable and free of animal-derived substances, detergents (except lysis) and organic solvents. The process delivers high-purity plasmid DNA of homogeneities up to 98% supercoiled form at a high yield in any desired final buffer.
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 2005, 52, 3; 703-711
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Intranuclear trafficking of plasmid DNA is mediated by nuclear polymeric proteins lamins and actin
Autorzy:
Ondřej, Vladan
Lukášová, Emilie
Krejčí, Jana
Kozubek, Stanislav
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1040744.pdf
Data publikacji:
2008
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
plasmid DNA
DNA double-strand breaks
nuclear actin
lamin A/C
Opis:
Functions of nuclear polymeric proteins such as lamin A/C and actin in transport of plasmid DNA were studied. The results show that the lamina plays an important role in plasmid DNA's entry into the cell nucleus from the cytoplasm. Selective disruption of lamin A/C led to a halt in plasmid DNA transport through the nuclear envelope. Inside the nucleus, plasmid DNA was frequently localized at sites with impaired genome integrity, such as DNA double-strand breaks (DSBs), occurring spontaneously or induced by ionizing radiation. Polymeric actin obviously participates in nuclear transport of plasmid DNA, since inhibition of actin polymerization by latrunculin B disturbed plasmid transport inside the cell nucleus. In addition, precluding of actin polymerization inhibited plasmid co-localization with newly induced DSBs. These findings indicate the crucial role of polymeric actin in intranuclear plasmid transport.
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 2008, 55, 2; 307-315
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Effect of Mg2+ on kinetics of oxidation of pyrimidines in duplex DNA by potassium permanganate.
Autorzy:
Łoziński, Tomasz
Wierzchowski, Kazimierz
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1044147.pdf
Data publikacji:
2001
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
oxidation of pyrimidines
thymine glycol
magnesium ions
rate constant of oxidation
pDS3 plasmid DNA
quantitative permanganate footprinting
Opis:
Potassium permanganate oxidation of pyrimidine bases is often used to probe single-stranded regions in functional DNA-protein complexes. However, so far reactivity of these bases in double-stranded DNA has not been studied quantitatively. We have investigated the kinetics of oxidation of pyrimidines in supercoiled pDS3 plasmid dsDNA by quantitative KMnO4 footprinting, in connection with parallel studies on the effect of Mg2+ on kinetics of oxidation of individual thymines in the single-stranded region of the open transcription complex of Escherichia coli RNA polymerase at a cognate Pa promoter contained in this plasmid. Rate constants of oxidation for pyrimidines, kj, in selected regions of pDS3 DNA, including Pa promoter, were determined under single-hit reaction conditions in the absence and presence of 10 mM MgCl2. Their values appeared to be sequence-dependent and were: (i) the largest for Ts in 5'TA3' and 5'TC3' steps, while 2-4 times smaller for 5'-adjacent ones in TT(A,G,C) and TTT(A) runs, (ii) for Cs in 5'TC3' steps 2-4 fold smaller than for adjacent Ts, and (iii) in the presence of Mg2+ generally larger by a sequence-dependent factor: in 5'TC3' steps of about 2 and 4 for Ts and Cs, respectively, in 5'TA3' steps of TTA and TTTA sequences for 3'-terminal Ts of about 3, while for their 5'-neighbors of a distinctly smaller value of about 2. Comparison of kj data for corresponding Ts located between +1 and -10 regions of Pa promoter in dsDNA and in ssDNA form in the open transcription complex, reported elsewhere, demonstrates that reactivity of pyrimidines in dsDNA is by 2-3 orders of magnitude smaller. The effect of Mg2+ in dsDNA is interpreted in terms of electrostatic barrier to diffusion of MnO4- on DNA surface, which is lowered by diffusive binding of these ions to backbone phosphates, involving also sequence-specific contacts with bases in the minor and major grooves of B-DNA.
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 2001, 48, 2; 511-523
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Protection of cattle against bovine leukemia virus (BLV) infection could be attained by DNA vaccination
Autorzy:
Brillowska, Anna
Dąbrowski, Sławomir
Rułka, Jan
Kubiś, Piotr
Buzała, Ewa
Kur, Józef
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1044457.pdf
Data publikacji:
1999
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
DNA vaccine
env gene
expression plasmid
immunization
Opis:
The bovine leukemia virus (BLV) envelope gene encoding extracellular glycoprotein gp51 and transmembrane glycoprotein gp30 was cloned into a vehicle expression vector under the human cytomegalovirus (CMV) intermediate early promoter. The intramuscular injection of this plasmid vector generated a cellular immune response. Seven out of ten cows vaccinated with the DNA construct resisted a drastic challenge (500 BLV-infected lymphocytes as an infectious dose).
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 1999, 46, 4; 971-976
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
1H-Benzimidazole derivatives as mammalian DNA topoisomerase I inhibitors
Autorzy:
Alpan, A
Gunes, H
Topcu, Zeki
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1040939.pdf
Data publikacji:
2007
Wydawca:
Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Tematy:
1H-benzimidazole derivatives
type I DNA topoisomerase
plasmid supercoil relaxation assays
Opis:
Benzimidazole is one of the most important heterocyclic groups manifesting various biological properties, such as antibacterial, antifungal, antimicrobial, antiprotozoal and antihelmintic activities. Several benzimidazole derivatives are also active as inhibitors of type I DNA topoisomerases. In this study, three 1H-benzimidazole derivatives with different electronic characteristics at position 5-, namely 5-chloro-4-(1H-benzimidazole-2-yl)phenol (Cpd I), 5-methyl-4-(1H-benzimidazole-2-yl)phenol (Cpd II) and 4-(1H-benzimidazole-2-yl)phenol (Cpd III), were synthesized and evaluated for their effects on mammalian type I DNA topoisomerase activity using quantitative in vitro plasmid supercoil relaxation assays. For the structure elucidation of the compounds, melting points, UV, IR, 1H NMR, 13C NMR, mass spectral data and elemental analyses were interpreted. Among the compounds, 5-methyl-4-(1H-benzimidazole-2-yl)phenol (Cpd II) manifested relatively potent topoisomerase I inhibition.
Źródło:
Acta Biochimica Polonica; 2007, 54, 3; 561-565
0001-527X
Pojawia się w:
Acta Biochimica Polonica
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Large size dna in vitro and in vivo delivery using chitosan transfection
Autorzy:
Sankov, Vladislav
Shagdarova, Balzhima
Varlamov, Valerii
Esipov, Roman
Svirshchevskaya, Elena
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/1034546.pdf
Data publikacji:
2017
Wydawca:
Sieć Badawcza Łukasiewicz - Polskie Towarzystwo Chitynowe
Tematy:
DNA delivery
chitosan derivatives
hydrophobic groups
рRFP pmKate2 reporter plasmid
Opis:
In modern medicine, many diseases can be treated using gene therapy, which requires a DNA delivery system to prevent DNA from degradation and to transport it to the cells. Liposomal reagents are expensive for such a therapy and new inexpensive biodegradable DNA carriers are required. Chitosan (Ch) is a cationic polymer with promising potency for gene delivery. Some Ch derivatives have been shown to efficiently transfect mammalian cells in vitro. However, there are many inconsistencies in the literature concerning the effectiveness of Ch systems for in vivo gene transfer. The aim of this work was to develop a Ch-based vector for in vivo delivery of a large-size DNA fragment coding for the far-red fluorescent protein (RFP). Among several Ch derivatives, hexanoyl-Ch (HCh) with a molecular weight of 20 kDa effectively transfected cells in vitro. Intratumoural injection of polyplexes in colon and lung tumours resulted in local expression of RFP in tumours.
Źródło:
Progress on Chemistry and Application of Chitin and its Derivatives; 2017, 22; 190-200
1896-5644
Pojawia się w:
Progress on Chemistry and Application of Chitin and its Derivatives
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. II. Preparation of the intermediate vector - bluescript plasmid for ligation with the inserts
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66467.pdf
Data publikacji:
1999
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
cloning
I-18 C gene
plasmid
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
Opis:
The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene in regard to the preparation of the intermediate vector i.e. the bluescript for the ligation with the ORF I and II reflecting DNA fragments, is presented. The main steps include the Eco RV digestion of the bluescript plasmid, the phenol / methylene chloride extraction of the plasmid, dephosphorylation of the bluescript plasmid and finally its extraction with the phenol and ethanol precipitation.
Przedstawiono technologię, którą zastosowano do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających translacyjną otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: przygotowania wektora pośredniego - plazmidu blueskrypt do ligacji z wymienionymi sekwencjami wstawek. Główne etapy obejmują: trawienie plazmidu blueskrypt enzymem Eco RV, ekstrakcję plazmidu fenolem/ chlorkiem metylenu, defosforylację plazmidu blueskrypt, ostatecznie jego oczyszczenie poprzez ekstrakcję fenolową i precypitację etanolem.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. V. Identification of the bacterial colonies, containing the recombinant bluescript plasmids
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/65003.pdf
Data publikacji:
1999
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
pET-3a vector
promoter system
cloning
I-18 C gene
T7 RNA polymerase
plasmid
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
DNA fragment
identification
Opis:
The technology applied for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments in regard to the identification of the bacterial colonies, of E. coli XL-1 strain, containing the recombinant bluescript plasmids, is described. The particular steps include: the α-complementation test, growing of the preliminary selected bacterial colonies in culture, isolation of the plasmids from these colonies, the Nde I and Bam HI digestion of the plamids mini-preparations, analysis of the digestion products and the identification of the bacterial colonies, containing the bluescript plasmids with the cloned inserts by the agarose gel electrophoresis (2% gel, 1 x TBE buffer).
Opisano technologię zastosowaną do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans, w zakresie: identyfikacji kolonii bakteryjnych szczepu XL-1, zawierających zrekombinowane plazmidy blueskrypt. Poszczególne etapy obejmowały: test α-komplementacji, hodowlę wstępnie wybranych kolonii bakteryjnych, izolację plazmidów bakteryjnych poszczególnych kolonii z tych hodowli, trawienie mini-izolatów plazmidów Nde I i Bam HI, analizę produktów trawienia i identyfikację kolonii bakteryjnych, zawierających plazmidy blueskrypt z wklonowanymi wstawkami przy zastosowaniu elektroforezy w żelu agarozowym (2% żel, 1 x stężony bufor TBE).
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. I. Preparation of the bacterial cells, transformation and isolation of the bluescript plasmid
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66849.pdf
Data publikacji:
1999
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
transformation
promoter system
gene expression
cloning
I-18 C gene
isolation
T7 RNA polymerase
plasmid
Chironomus tentans
bacterial cell
polymerase chain reaction
DNA fragment
Opis:
The technology applied for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene of Chironomus tentans in regard to the preparation of the competent E. coli cells of the XL-1 strain needed for the transformation with the ligation reaction products, is presented. Also the transformation of these bacterial cells with the bluescript plasmid and its isolation for these cloning experiments, are described.
Opisano technologię, którą zastosowano do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających translacyjną otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: przygotowania kompetentnych komórek E. coli szczepu XL-1, poddawanych następnie transformacji produktami reakcji ligacji. Przedstawiono także zastosowaną technologię transformacji wymienionych komórek bakteryjnych przy użyciu plazmidu - blueskrypt oraz izolację tego plazmidu, w celu jego zastosowania w wymienionych eksperymentach klonowania.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
Tytuł:
Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. VIII. The ligations of the inserts with the pET-3a vector and the identification of the bacterial colonies, containing the recombinant plasmids
Autorzy:
Borowicz, B P
Powiązania:
https://bibliotekanauki.pl/articles/66584.pdf
Data publikacji:
1999
Wydawca:
Polska Akademia Nauk. Czytelnia Czasopism PAN
Tematy:
pET-3a vector
promoter system
cloning
I-18 C gene
T7 RNA polymerase
Chironomus tentans
polymerase chain reaction
expression
DNA fragment
recombinant plasmid
identification
Opis:
The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments in regard to the ligations of the inserts with the pET-3a vector and the identification of the bacterial colonies, containing the recombinant plasmids, is presented. The main steps include: calculation of the molar ratios of the vector to insert DNA, the ligation reactions, transformation of the competent E. coli cells of the XL-1 strain, isolation of the plasmids, digestion of the plasmid preparations with the Nde I and Bam HI to indicate the presence of the inserts cloned into the plasmids, using the agarose gel electrophoresis (2% gel, 1 x TBE buffer) of the plasmids samples, with the released inserts, after the digestion, transformation of the competent BL21 (DE3) cells of E. coli with the isolated recombinant plasmids, identification of the bacterial cells, carrying the pET-3a plasmids with the cloned inserts and the storage of these cells.
Przedstawiono technologię użytą do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie ligacji wstawek z wektorem pET-3a oraz identyfikacji kolonii bakteryjnych, zawierających rekombinacyjne plazmidy. Główne etapy obejmują: obliczenie stosunków molarnych wektora do DNA wstawki, reakcje ligacji, transformację komórek kompetentnych E. coli szczepu XL-1, izolację plazmidów, trawienie preparatów plazmidów Nde I i Bam Hl w celu wskazania obecności wklonowanych do plazmidów wstawek, uwolnionych z tych plazmidów poprzez trawienie wymienionymi enzymami restrykcyjnymi. Analizę produktów trawienia poszczególnych próbek plazmidów wykonano przy użyciu elektroforezy w żelu agarozowym (2% żel, 1 x stężony bufor TBE). Następne etapy to transformacja komórek kompetentnych E. coli BL21(DE3) preparatami wyizolowanych zrekombinowanych plazmidów pET-3a i identyfikacja komórek bakteryjnych, zawierających plazmidy pET-3a z wklonowanymi wstawkami oraz przechowywanie tych komórek.
Źródło:
Journal of Plant Protection Research; 1999, 39, 1
1427-4345
Pojawia się w:
Journal of Plant Protection Research
Dostawca treści:
Biblioteka Nauki
Artykuł
    Wyświetlanie 1-12 z 12

    Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies