- Tytuł:
-
Use of o-phosphoserine [OPS] for the separation of peptides on immobilized copper ions
Wykorzystanie OPS w procesie rozdzialu peptydow na unieruchomionych jonach miedzi - Autorzy:
- Karas, M
- Powiązania:
- https://bibliotekanauki.pl/articles/14435.pdf
- Data publikacji:
- 2010
- Wydawca:
- Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie / Polskie Towarzystwo Magnezologiczne im. Prof. Juliana Aleksandrowicza
- Tematy:
-
o-phosphoserine
separation
peptide
immobilized copper ion
copper ion
metal ion
protein
diet component
bioactive peptide - Opis:
-
Recent research into the structure and properties of proteins and peptides as physiologically active diet components has spurred a new interest in the isolation and investigation of bioactive peptides of animal, plant and microbiological origin. The isolation and separation of protein and peptide mixtures requires advanced procedures. It usually involves a multi-stage separation process on chromatographic columns with various packing. Immo- bilised Metal Ion Affinity Chromatography (IMAC) is frequently used in the complex process of obtaining peptide fractions. Affinity Chromatography (IMAC) relies on the specific interactions between amino acids, their reactive groups in proteins and peptides and „transitory” metal ions, in particular Cu2+. Those ions are immobilised by the chelating compound on the bed, forming specific adsorbents which bind proteins and peptides. The aim of this study was to determine whether o-phosphoserine (OPS) can be used for the immobilization of copper ions on Sephadex G25 during the separation of peptides and proteins isolated from string beans. Frozen pods of dwarf, green-podded string bean cv. Fana were used in the study. Peptide were extracted from well-homogenized string bean pods with tris-HCl buffer (pH 7.5), from which high molecular weight proteins were isolated with methanol, acetone, 20% trichloroacetic acid and the Magnafloc M-22S cation flocculant. The protein and peptide content of the separated fractions was determined. The peptide content depended on the type of extract from which high molecular weight proteins were isolated. The results obtained by using OPS as a chelating agent in the separation of string bean can be recommended for analysis of plant peptides.
Rozwój nauki o strukturze oraz właściwościach białek i peptydów jako fizjologicznie aktywnych składnikach diety przyczynił się do wzrostu zainteresowania izolowaniem i badaniem bioaktywnych peptydów pochodzenia zwierzęcego, roślinnego i mikrobiologicznego. Izolowanie i rozdział mieszanin białek i peptydów wymaga zaawansowanej procedury. Stosuje się zazwyczaj kilkustopniowy rozdział na kolumnach chromatograficznych z różnym wypełnieniem. W tak skomplikowanym procesie otrzymywania frakcji peptydowych szerokie zastosowanie znalazła chromatografia powinowactwa na unieruchomionych jonach metali IMAC (Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography). Chromatografia powinowactwa wykorzystuje specyficzne oddziaływania między aminokwasami oraz ich reaktywnymi ugrupowaniami w białkach i peptydach a jonami metali „przejściowych”, szczególnie zaś z Cu2+. Jony te są immobilizowane przez związek chelatujący na złożu, i w ten sposób stanowią specyficzne adsorbenty wiążące białka lub peptydy. Celem pracy było zbadanie przydatności OPS (o-fosfoseryny) jako czynnika unieruchamiającego jony miedzi na złożu w procesie rozdziału peptydów i białek wyizolowanych z fasoli szparagowej metodą IMAC. Materiałem do badań były mrożone strąki fasoli szparagowej karłowatej zielonostrąkowej, odmiany Fana. Peptydy i białka izolowano z fasoli szparagowej buforem Tris-HCl, z otrzymanego ekstraktu białka wysokocząsteczkowe wydzielono: metanolem, acetonem, 20% kwasem trichlorooctowym i kationowym flokulantem Magnafloc M-22S. W otrzymanych frakcjach oznaczono zawartość białka i peptydów. Peptydy obecne w fasoli szparagowej charakteryzowały się zbliżonym powinowactwem do jonów miedzi. Wykazano, że rozdział peptydów zależy w małym stopniu od właściwości czynnika zastosowanego podczas usuwania białek z ekstraktu. Przebieg rozdziału z wykorzystaniem OPS jako czynnika chelatującego w technice IMAC z powodzeniem może być stosowany do rozdziału peptydów z ekstraktów roślinnych. - Źródło:
-
Journal of Elementology; 2010, 15, 1; 101-110
1644-2296 - Pojawia się w:
- Journal of Elementology
- Dostawca treści:
- Biblioteka Nauki
Artykuł