Wplyw soku z buraka cwiklowego i aronii in vitro na metabolizm tlenowy i apoptoze ludzkich granulocytow obojetnochlonnych

Jednym z głównych źródeł reaktywnych form tlenu (RFT) w organizmie człowieka są pobudzone granulocyty obojętnochłonne (PMN). Zachwianie równowagi pomiędzy produkcją RFT a ich detoksykacją przez ustrojowe systemy przeciwutleniające prowadzi do stanów zapalnych związanych z infiltracją granulocytów oraz rozprzestrzenienia się reakcji utleniania komórkowych makrocząsteczek, co m.in. może prowadzić do inicjacji karcinogenezy. Apoptoza PMN jest fizjologiczną programowaną śmiercią komórki, która może ograniczyć proces zapalny. Enzymami, którym przypisuje się kluczowe znaczenie w przebiegu efektorowej, nieodwracalnej fazy apoptozy są kaspazy. Celem pracy była ocena wpływu soku z buraka ćwikłowego (Beta vulgaris var. rubra) i aronii czarnoowocowej (Aronia melanocarpa Elliot) na metabolizm tlenowy i apoptozę ludzkich granulocytów obojętnochłonnych. Oceniano intensywność chemiluminescencji zależnej od luminolu PMN aktywowanych estrami forbolu, stężenie nadtlenku wodoru metodą cytometrii przepływowej z zastosowaniem dioctanu 2’,7’-dichlorofluorescyny oraz aktywność kaspazy 3 metodą FIENA. Stwierdzono, że: − sok z buraka ćwikłowego lub aronii skutecznie hamował produkcję reaktywnych form tlenu przez aktywne granulocyty w testach in vitro, − badane preparaty indukowały aktywność kaspazy 3 stymulowanych PMN po 24 h inkubacji. Wyniki wskazują, że badane składniki żywności mogą być obiecującym elementem chemioprofilaktyki nowotworowej.

Activated polymorphonuclear neutrophils (PMN) generate extremely high amounts of reactive oxygen species (ROS), but these are normally targeted at pathogens inside intracellular phagosomes. These same beneficial antimicrobial functions can cause significant local tissue injury and lead to the development of pathologic systemic inflammatory conditions. PMN apoptosis is a major mechanism associated with the resolution of inflammatory reactions. Caspase 3 activation is the first step in the execution phase of apoptosis. The goals of the present study was to investigate the in vitro effect of beetroot (Beta vulgaris var. rubra) and chokeberry (Aronia melanocarpa Elliot) juice on oxidative metabolism and apoptosis in human polymorphonuclear granulocytes. PMN oxidant production, in response to phorbol myristate acetate, was characterized by a dichlorofluorescin oxidation assay and luminol- dependent chemiluminescence. Caspase 3 activation was assayed by the method of DEVD-AMC cleavage in PMN cultured up to 24 hours. The results of our study showed: 1/ beetroot and chokeberry juice affected the concentration-dependent inhibition of H2O2 production and chemiluminescence response by PMN, 2/ we also observed their proapoptotic effects. These natural products could be an important adjunct in cancer chemoprevention.