Wykorzystanie markerow RAPD do analizy zmian genetycznych zwiazanych z dlugotrwalym przechowywaniem i regeneracja ziarniakow zyta [Secale cereale L.]

Celem pracy była analiza zmian zachodzących na poziomie DNA w wyniku procesu długiego przechowywania ziarniaków żyta i ich późniejszej regeneracji w warunkach polowych w oparciu o markery typu RAPD. W tym celu przeanalizowano trzy populacje żyta 'Dańkowskie Złote', różniące się okresem przechowywania i liczbą cykli kolejnych regeneracji. Izolację DNA z 75 żywych ziarniaków z każdej serii przeprowadzono przy użyciu techniki SDS. Reakcję PCR (Łańcuchowa reakcja polimerazy) prowadzono kolejno w obecności jednego z 5-ciu 10-nukleotydowych starterów. Mieszaninę reakcyjną rozdzielano elektroforetycznie na żelu agarozowym. Uzyskano łącznie dla wszystkich populacji 110 markerów RAPD. Zaobserwowano istotne statystycznie różnice w częstotliwości 50 z nich. Te różnice mogą świadczyć o zmianach w strukturze genetycznej populacji, będących efektem długotrwałego przechowywania i regeneracji ziarniaków.

The aim of studies was to analyse the genetic changes in rye seeds induced by natural ageing during long-term storage in a seed bank and after regeneration in field conditions, by means of RAPD markers. In our experiment, the seeds of three populations of different age and two different reproduction cycles of Dańkowskie Złote rye were used. Genomic DNAs were isolated from 75 seeds of each sample. The polymerase chain reaction was accomplished by means of five primers which were ten nucleotides long each. One hundred and ten RAPD markers were shared among the series. Changes in the frequency of fifty markers were statistically significant among the populations. These changes could be attributed to genetic changes related to long-term storage and regeneration of seeds.