Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. IV. The ligation of the bluescript vector with the inserts

The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene in regard to the ligation reactions of the bluescript vector with the inserts, is presented. The main steps include: the calculation of the molar ratio of the bluescript plasmid to the ORF I and II reflecting DNA fragments as the inserts, the ligation reaction, the transformation of the E. coli cells of the XL- 1 strain with the ligation reactions products and growing of the transformed bacterial cells.

Przedstawiono technologię użytą do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: reakcji ligacji wektora blueskrypt ze wstawkami sekwencji klonowanych wymienionych wyżej. Przedstawione główne etapy obejmują: obliczenie stosunku molarnego plazmidu blueskrypt do fragmentu DNA odzwierciedlającego otwartą ramę odczytu I i II. Fragmenty te zostały użyte jako wstawki. Przedstawiono także zastosowaną technologię dotyczącą reakcji ligacji, transformacji komórek bakteryjnych E. coli szczepu XL-1 produktami reakcji ligacji oraz hodowlę na płytkach agarowych stransformowanych komórek bakterii.