African swine fever is an acute, febrile and highly virulent porcine disease causing serious economic
losses worldwide. The pK205R protein of the African swine fever virus (ASFV) is largely
expressed in the early stages of infection, which has given the K205R gene extensive attention. In this
study, the ASFV K205R was cloned and expressed in Escherichia coli BL21 (DE3). Expression of
histidine-tagged pK205R with a molecular mass of 44 kDa was determined by 12% sodium dodecyl
sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blot analysis. Optimisation of
culture conditions allowed induction of the recombinant protein with 0.4 mM Isopropyl
β-D-thiogalactoside (IPTG) at 37oC for 2 h. The protein existed in cellular supernatant and was
purified using a Ni-NTA resin column. The purified protein was used to immunize rabbits four times
to enable the production of polyclonal antibodies, and the antiserum titre was detected by ELISA.
The results showed that the purified pK205R can react with ASFV positive serum specifically by
Western blotting. The pK205R had high antigenicity, which indicated that pK205R could be used as
an antigen for detection of ASFV-specific antibodies in ELISA testing, and the recombinant protein
could contribute to further research of the action and structure of pK205R.
Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies
Informacja
SZANOWNI CZYTELNICY!
UPRZEJMIE INFORMUJEMY, ŻE BIBLIOTEKA FUNKCJONUJE W NASTĘPUJĄCYCH GODZINACH:
Wypożyczalnia i Czytelnia Główna: poniedziałek – piątek od 9.00 do 19.00