Differentiation of Listeria monocytogenes on the basis of hemolytic and phosphatidylinositol specific phospholipase C activity and by PCR method

The possibility of differentiation of L.monocytogenes from other Listeria species on the basis of hemolytic activity, the production of phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PI-PLC) and the polymerase chain reaction (PCR) for the amplification of a DNA fragment of listeriolysine O (hly A) gene was compared. The screening of Listeria colonies for PI-PLC activity allowed to distinguish the pathogenic for humans L.monocytogenes bacteria from the majority of non-pathogenic Listeria spp. The amplification of DNA from Listeria lysates with two primers selected in area of the hly A gene made possible the differentiation of L.monocytogenes from other Listeria species, including hemolytic L.ivanovii and L.seeligeri bacteria as well as hemolytic or PI-PLC positive L.innocua strains.

Żywność zanieczyszczona Listeria monocytogenes byía notowana jako źródło zakażeń pokarmowych o charakterze epidemicznym w krajach w Europie i Ameryce Północnej. W związku z tym koniecznością się stalo opracowanie szybkich i czuîych testów wykrywania i identyfikacji pałeczek L. monocytogenes. W pracy porównano przydatność trzech testów do odróżniania chorobotwórczych dla człowieka bakterii L. monocytogenes od innych niepatogennych gatunków Listeria. Uzyskane wyniki wskazują, na niewielką przydatność oceny aktywności hemolitycznej dla różnicowania szczepów L. monocytogenes od niechorobotwórczych dla ludzi szczepów L. ivanovii, L. seeligeri oraz L. innocua. Różnicowanie takich szczepów w oparciu o aktywność fosfolipazy C fosfatydyloinozytolu wykazuje wyższą specyficzność. Cechę taką wykazywały wszystkie badane szczepy L. monocytogenes i tylko jeden szczep L. innocua spośród 9 niepatogennych szczepów Listeria. Amplifikacja fragmentu DNA w obrębie genu dla listeriolizyny O (hly A) L. monocytogenes, pozwoliła odróżnić wszystkie (18) szczepy L. monocytogenes od niepatogennych dla człowieka bakterii L. ivanovii, L. innocua, L. seeligeri, L. welshimeri oraz L. grayi. Trawienie produktu amplifikacji DNA enzymem Taq I, pozwoliło na wyodrębnienie dwóch typów w obrębie grupy badanych szczepów L. monocytogenes.