A phage-displayed random 7-mer disulfide bridge-constrained peptide library was used to map the surface of the RhoA GTPase and to find peptides able to recognize RhoA switch regions. Several peptide sequences were selected after four rounds of enrichment, giving a high signal in ELISA against RhoA-GDP. A detailed analysis of one such selected peptide, called R2 (CWSFPGYAC), is reported. The RhoA - R2 interaction was investigated using fluorescence spectroscopy, chemical denaturation, and determination of the kinetics of nucleotide exchange and GTP hydrolysis in the presence of RhoA regulatory proteins. All measurements indicate that the affinity of the R2 peptide for RhoA is in the micromolar range and that R2 behaves as an inhibitor of: i) GDP binding to the apo form of RhoA (Mg2+- and nucleotide-free form of the GTPase), ii) nucleotide exchange stimulated by GEF (DH/PH tandem from PDZRhoGEF), and iii) GTP hydrolysis stimulated by the BH domain of GrafGAP protein.
Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies
Informacja
SZANOWNI CZYTELNICY!
UPRZEJMIE INFORMUJEMY, ŻE BIBLIOTEKA FUNKCJONUJE W NASTĘPUJĄCYCH GODZINACH:
Wypożyczalnia i Czytelnia Główna: poniedziałek – piątek od 9.00 do 19.00